[發明專利]一種小麥粉及其制品中間苯二酚的高效液相色譜測定方法

在審

• 申請號: 201811462566.0
• 申請日: 2018-12-03
• 公開（公告）號: CN109298101A
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 宿書芳;別梅;程志;丁一;武傳香;薛霞;劉艷明
• 申請（專利權）人: 山東省食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74;G01N30/64
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 王翠翠

本發明公開了一種小麥粉及其制品中間苯二酚的高效液相色譜測定方法，采用以下步驟：（1）前處理：稱取小麥粉或其制品樣品，加入甲醇渦旋混勻，超聲，加入亞鐵氰化鉀和乙酸鋅，用甲醇定容至刻度，離心，取上清液過有機相濾膜，待上機；（2）標準溶液的配制；（3）獲得液相色譜圖、回歸方程；（4）樣品分析：用高效液相色譜儀配二極管陣列檢測器串聯熒光檢測器對樣品進行分析檢測。該方法采用紫外檢測器和熒光檢測器串聯檢測，有效避免了單一檢測器定性手段單一的問題，增強了定性定量可靠性。方法操作簡單、靈敏度高、選擇性好、檢出限低，非常適用于小麥粉及其制品中痕量間苯二酚的定性、定量檢測。

技術領域

本發明屬于涉及一種小麥粉及其制品中間苯二酚的高效液相色譜測定方法，屬于食品檢測技術領域。

背景技術

間苯二酚（英文名Resorcinol）是一種重要的化工原料，也是實驗室中一種常用試劑，已被證實為內分泌干擾物，長期接觸，可導致皮炎、黏膜炎、驚厥和發紺等健康危害。因此，在醫藥和化妝品產品中有著嚴格的使用限量。在食品領域，我國國家標準GB2760-2014《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》把其列為允許使用的食品用合成香料，在各類食品中按生產需要適量使用。但依據原食藥總局關于進一步加強小麥粉質量安全監管的公告（2017年第132號），小麥粉中禁止添加過氧化苯甲酰、次磷酸鈉、硫脲、間苯二酚等非食品原料。因此，加強小麥粉中間苯二酚的使用監管尤為重要。目前，小麥粉及其制品中間苯二酚的檢測尚無方法標準，也無文獻報道，不僅導致小麥粉及其制品生產企業在原料進貨查驗、出廠檢驗等環節缺少可靠的檢驗方法，還嚴重影響食品藥品監管部門對小麥粉及其制品生產企業的日常監督檢查與風險監測。綜上，研究建立小麥粉及其制品中間苯二酚的檢測方法意義重大。

目前， 已報道的測定間苯二酚的方法有分光光度法、電化學法、同步熒光法、氣相色譜法、離子色譜法和液相色譜法等。

發明內容

本研究建立一種小麥粉及其制品中間苯二酚含量的高效液相色譜測定方法，方法采用紫外檢測器和熒光檢測器串聯檢測，有效避免了單一檢測器定性手段單一的問題，增強了定性定量可靠性。方法操作簡單、靈敏度高、選擇性好、檢出限低，非常適用于小麥粉及其制品中痕量間苯二酚的定性、定量檢測。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種小麥粉及其制品中間苯二酚的高效液相色譜測定方法，采用以下步驟：

（1）前處理：稱取小麥粉或其制品樣品，加入甲醇渦旋混勻，超聲，加入亞鐵氰化鉀和乙酸鋅，用甲醇定容至刻度，離心，取上清液過有機相濾膜，待上機；

（2）標準溶液的配制：準確稱取10mg間苯二酚標準品于10mL 容量瓶中，甲醇定容至刻度，得到濃度為1mg/mL的標準儲備液，工作標準溶液用甲醇逐級稀釋；

（3）獲得液相色譜圖、回歸方程：取步驟（2）中的系列標準工作溶液上機測定，得到標準溶液色譜圖，以標準溶液峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，繪制標準曲線，得到線性回歸方程；

（4）樣品分析：用高效液相色譜儀配二極管陣列檢測器和串聯熒光檢測器對樣品進行分析檢測。

本發明所述的測定方法，前處理的步驟為：稱取5g樣品于25mL比色管中，加入15mL甲醇渦旋混勻，超聲15min, 加入1mL 92 g/L亞鐵氰化鉀和1mL 183 g/L乙酸鋅，用甲醇定容至刻度，搖勻，于7000r/min離心3min，取上清液過0.22μm有機相濾膜，待上機。

本發明所述的測定方法，高效液相色譜儀的流動相為：甲醇/水、乙腈/水、甲醇/20mmol/L醋酸銨或乙腈/20mmol/L醋酸銨。

本發明所述的測定方法，高效液相色譜儀型號：Waters 2695或Thermo Ultimate；色譜柱：C18-Amide柱長150mm，柱內徑4.6mm，填料內徑3μm，流動相：A為水，B為甲醇。