[發(fā)明專利]從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類化合物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811457237.7
• 申請(qǐng)日: 2018-11-30
• 公開（公告）號(hào): CN109541063B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹清明;胡丹丹;師明月;歐青媛;周文化
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南林業(yè)科技大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 趙志遠(yuǎn)

本發(fā)明提供了一種從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類化合物的方法。所述方法為:將南山茶餅經(jīng)過浸提處理得到樣品液；將樣品液濕法上樣至大孔樹脂層析柱，用乙醇水溶液體系進(jìn)行梯度洗脫，收集含有目標(biāo)化合物的洗脫液，經(jīng)后處理得粗組分液；將粗組分液濕法上樣至聚酰胺樹脂層析柱，進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到粗提取物；將粗提取物用溶劑溶解后進(jìn)樣，使用第一C18ME色譜柱進(jìn)行HPLC半制備，用乙腈?甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，分別收集含有目標(biāo)化合物的流份段，濃縮凍干得到第一、第二目標(biāo)化合物。本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒?，從山茶屬植物中有效分離出目標(biāo)化合物，提取純度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化合物提取領(lǐng)域，具體而言，涉及一種從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類化合物的方法。

背景技術(shù)

南山茶又名廣寧紅花油茶(Camellia semiserrata Chi.)，屬于山茶科(Theaceae)山茶屬(Camellia L.)植物，多年生喬木或灌木。南山茶主要分布在我國的廣西東南部以及廣東西部。它是油茶的一種重要栽培物種。經(jīng)研究比較發(fā)現(xiàn)，在各類油茶中，廣寧紅花油茶中的化學(xué)成分相對(duì)比較豐富。

南山茶及其餅粕尤其富含具有多種生物活性的黃酮類和皂苷等化合物。目前，對(duì)油茶餅粕的研究主要集中在以總黃酮或皂苷為指標(biāo)進(jìn)行的各種提取工藝的優(yōu)化，還有一些著重于對(duì)得到的粗提物或初步純化物進(jìn)行抗氧化以及抑菌等活性方面的研究。但是，對(duì)提取物中具體成分的研究不夠。

山奈酚及其衍生物是油茶中一類重要的化合物，具有抗癌、治療糖尿病和骨質(zhì)疏松以及保護(hù)損傷細(xì)胞等功能。

分析南山茶中的有效活性物質(zhì)，將其活性成分從復(fù)雜多樣的成分中分離提取出來，得到純度較高的產(chǎn)品，對(duì)于南山茶的深度開發(fā)具有重要的作用。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類化合物的方法，所述方法首次從南山茶中提取出目標(biāo)化合物，而且快速有效、純度很高。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

一種從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類化合物的方法，所述方法包括以下步驟:

A.將南山茶餅經(jīng)過浸提處理得到樣品液；

B.將所述樣品液濕法上樣至大孔樹脂層析柱，用乙醇水溶液體系進(jìn)行梯度洗脫，收集含有第一目標(biāo)化合物和第二目標(biāo)化合物的洗脫液，經(jīng)后處理得粗組分液；

C.將所述粗組分液濕法上樣至聚酰胺樹脂層析柱，依次用蒸餾水、體積分?jǐn)?shù)為20％、40％、90％的乙醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有所述第一目標(biāo)化合物和所述第二目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到粗提取物；

D.將所述粗提取物用溶劑溶解后進(jìn)樣，使用第一C18ME色譜柱進(jìn)行HPLC半制備，用乙腈-甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，收集含有所述第一目標(biāo)化合物的第一流份段，濃縮凍干得到所述第一目標(biāo)化合物；收集含有所述第二目標(biāo)化合物的第二流份段，濃縮凍干得到所述第二目標(biāo)化合物；所述第一目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

所述第二目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

根據(jù)南山茶浸提液中的主要成分及目標(biāo)化合物的性質(zhì)，采用浸提-萃取-大孔樹脂柱層析-C18ME色譜柱洗脫-聚酰胺樹脂柱層析-C18ME色譜柱高效液相色譜制備的方法，有效將兩個(gè)目標(biāo)化合物從南山茶的復(fù)雜成分中分離出來。

優(yōu)選地，所述步驟B中，所述大孔樹脂層析柱的制備方法為：先用乙醇浸泡D101大孔樹脂，然后裝柱，依次用乙醇、水沖洗至無乙醇味。