[發(fā)明專(zhuān)利]從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類(lèi)化合物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811457237.7
• 申請(qǐng)日: 2018-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109541063B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹清明;胡丹丹;師明月;歐青媛;周文化
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中南林業(yè)科技大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 趙志遠(yuǎn)

1.一種從南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷類(lèi)化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟:

A.將南山茶餅經(jīng)過(guò)浸提處理得到樣品液；所述浸提處理的方法為：用體積分?jǐn)?shù)為50-60％的乙醇水溶液浸提，料液比為1kg所述南山茶餅對(duì)應(yīng)2-4L所述乙醇水溶液，在60-70℃加熱回流浸提2-4次，過(guò)濾、合并得到提取液；然后減壓濃縮，再用正丁醇萃取得到萃取液，加水稀釋18-22倍得到所述樣品液；

B.將所述樣品液濕法上樣至大孔樹(shù)脂層析柱，用乙醇水溶液體系進(jìn)行梯度洗脫，收集含有第一目標(biāo)化合物和第二目標(biāo)化合物的洗脫液，經(jīng)后處理得粗組分液；所述大孔樹(shù)脂層析柱的制備方法為：先用乙醇浸泡D101大孔樹(shù)脂，然后裝柱，依次用乙醇、水沖洗至無(wú)乙醇味；所述乙醇水溶液體系為：體積分?jǐn)?shù)為5％、15％、50％、95％的乙醇水溶液；所述大孔樹(shù)脂層析柱的柱體積BV1為10L，所述5％乙醇水溶液的用量為6倍BV1、所述15％乙醇水溶液的用量為8倍BV1、所述50％乙醇水溶液的用量為8倍BV1、所述95％乙醇水溶液的用量為4倍BV1；收集用所述15％乙醇水溶液洗脫的洗脫液；所述后處理為：將洗脫液減壓蒸餾除去乙醇，然后用第二C18ME色譜柱、以甲醇作為流動(dòng)相進(jìn)行洗脫做DAC富集，接收流出液減壓濃縮直至無(wú)液體旋出，用體積比為1:1的甲醇和丙酮溶解得所述粗組分液；所述第二C18ME色譜柱規(guī)格為：100A，50mm×250mm，10μm；

C.將所述粗組分液濕法上樣至聚酰胺樹(shù)脂層析柱，依次用蒸餾水、體積分?jǐn)?shù)為20％、40％、90％的乙醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有所述第一目標(biāo)化合物和所述第二目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到粗提取物；所述聚酰胺樹(shù)脂層析柱的柱體積BV2為1L；所述蒸餾水、所述體積分?jǐn)?shù)為20％乙醇水溶液、所述40％乙醇水溶液的用量均為5倍BV₂、所述90％乙醇水溶液的用量為2倍BV₂；所述梯度洗脫過(guò)程中，每500mL為一個(gè)收集單位，并順次編號(hào)，收集第19-22號(hào)洗脫液；

D.將所述粗提取物用溶劑溶解后進(jìn)樣，使用第一C18ME色譜柱進(jìn)行HPLC半制備，用乙腈-甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，收集含有所述第一目標(biāo)化合物的第一流份段，濃縮凍干得到所述第一目標(biāo)化合物；收集含有所述第二目標(biāo)化合物的第二流份段，濃縮凍干得到所述第二目標(biāo)化合物；所述第一C18ME色譜柱規(guī)格為：100A，20mm×250mm，10μm；所述乙腈-甲酸水溶液中乙腈與甲酸水溶液的體積比為19:81，所述甲酸水溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.1％；所述溶劑為所述乙腈-甲酸水溶液；所述第一目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

所述第二目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：