[發(fā)明專利]從朝鮮薊中提取愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811457225.4
• 申請(qǐng)日: 2018-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109180622B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹清明;張曉帆;岑嘉惠;莫海玲;劉子華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南林業(yè)科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D307/93
• 分類號(hào): C07D307/93
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 王獻(xiàn)茹

本發(fā)明提供了一種從朝鮮薊中提取愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物的方法。所述方法:將朝鮮薊粉碎后用乙醇水溶液浸提后得粗提液；粗提液上樣至AB?8型大孔樹(shù)脂層析柱進(jìn)行洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到粗提物；粗提物用50％甲醇溶解后上樣至RP?C18層析柱進(jìn)行洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到預(yù)分離物；將預(yù)分離物用乙腈水溶液溶解，進(jìn)行液相半制備，收集含有目標(biāo)化合物的流分段，濃縮凍干得到準(zhǔn)提取物；將準(zhǔn)提取物用甲醇水溶液溶解，進(jìn)行液相半制備，收集含有目標(biāo)化合物的流分段，濃縮凍干得到目標(biāo)化合物。本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒ǎ瑥某r薊中有效分離出目標(biāo)化合物，提取純度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及提取純化領(lǐng)域，具體而言，涉及一種從朝鮮薊中提取愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物的方法。

背景技術(shù)

朝鮮薊為菊科菜薊屬多年生草本植物，又名菜薊、洋薊、菊薊、荷花百合、法國(guó)百合，學(xué)名Cynara scolymus L.。原產(chǎn)于地中海沿岸，歐洲南部及北非，19世紀(jì)由法國(guó)傳入中國(guó)上海，現(xiàn)主要分布在上海、浙江、云南、湖南、山東及北京等地。朝鮮薊食用價(jià)值極高，有“蔬菜之皇”的美譽(yù)。

朝鮮薊葉提取物長(zhǎng)期以來(lái)一直用于民間醫(yī)藥，其體外和臨床試驗(yàn)表明，朝鮮薊提取物具有抗氧化、抑菌、抗癌抗腫瘤、保肝、降血糖、改善消化及改善高膽固醇血癥等功效，愈創(chuàng)木烷半倍萜內(nèi)酯作為其主要功效成分有望被開(kāi)發(fā)為治療炎癥性疾病(如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、特異性抗乙型肝炎病毒、II型糖尿病相關(guān)的新型PTP-1B抑制劑、血管生成抑制劑和治療多種癌癥的新藥物以及促進(jìn)胃動(dòng)力和治療胃潰瘍的新藥物。

但是現(xiàn)有技術(shù)對(duì)于其有效成分的分離純化研究有限。如何從朝鮮薊中提取出愈創(chuàng)木烷型半倍萜化合物等生物活性成分，對(duì)深度開(kāi)發(fā)朝鮮薊作物極其重要。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種從朝鮮薊中提取愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物的方法，從朝鮮薊中提取出目標(biāo)化合物，而且快速有效、純度高。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

一種從朝鮮薊中提取愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物的方法，所述方法包括以下步驟:

A.將朝鮮薊粉碎后用乙醇水溶液浸提后得到粗提液；

B.所述粗提液上樣至AB-8型大孔樹(shù)脂層析柱，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為20％、50％、80％的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到粗提物；

C.所述粗提物用甲醇水溶液溶解后上樣至RP-C18層析柱，依次用體積分?jǐn)?shù)為30％、48％和100％的甲醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集含有所述目標(biāo)化合物的洗脫液，濃縮凍干得到預(yù)分離物；

D.將所述預(yù)分離物用乙腈水溶液溶解，使用Venusil MP C18色譜柱、以流動(dòng)相A為乙腈、流動(dòng)相B為甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行第一次液相半制備，收集含有目標(biāo)化合物的流分段，濃縮凍干得到準(zhǔn)提取物；

E.將所述準(zhǔn)提取物用甲醇水溶液溶解，使用所述Venusil MP C18色譜柱、以流動(dòng)相C為甲醇、流動(dòng)相D為甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行第二次液相半制備，收集含有目標(biāo)化合物的流分段，濃縮凍干得到所述目標(biāo)化合物；所述目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

使用浸提－AB-8型大孔樹(shù)脂柱層析－RP-C18柱層析－乙腈/甲酸水溶液液相半制備－甲醇/甲酸水溶液液相半制備的方法，有效的將目標(biāo)化合物從朝鮮薊中分離出來(lái)。

優(yōu)選地，所述AB-8型大孔樹(shù)脂層析柱的制作方法為：先將AB-8型大孔樹(shù)脂顆粒用無(wú)水乙醇浸泡20-24h進(jìn)行預(yù)處理，然后裝柱，用水沖洗至無(wú)醇味。

預(yù)處理是為了有效的保障大孔樹(shù)脂柱層析的分離效果，避免雜質(zhì)的干擾。