[發(fā)明專利]提取木犀草素類化合物和菜薊苦素的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811457222.0
• 申請(qǐng)日: 2018-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109320571B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王元清;曹清明;李群;王蔚婕;李安平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南林業(yè)科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C07H17/07
• 分類號(hào): C07H17/07;C07H1/08;C07D307/93
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 趙志遠(yuǎn)

本發(fā)明提供了一種提取木犀草素類化合物和菜薊苦素的方法。所述方法:將朝鮮薊粉碎后浸提后得到粗提液；上樣至AB?8型大孔樹(shù)脂層析柱，收集洗脫液，濃縮凍干得到第一粗提物和第二粗提物；第一粗提物用甲醇水溶液溶解上樣至RP?C18層析柱，收集洗脫液，濃縮凍干得第一預(yù)分離物和第二預(yù)分離物；將第一預(yù)分離物用乙腈水溶液溶解，進(jìn)行第一液相半制備，收集流分段，濃縮凍干得第一目標(biāo)化合物和第二目標(biāo)化合物；將第二粗提物和第二預(yù)分離物重結(jié)晶，用50％甲醇溶解，進(jìn)行第二液相半制備，收集流分段，濃縮凍干得第三目標(biāo)化合物。本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒ǎ瑥某r薊中有效分離出目標(biāo)化合物，提取純度高，提取方法簡(jiǎn)單，有利于朝鮮薊的深度開(kāi)發(fā)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及提取純化領(lǐng)域，具體而言，涉及一種提取木犀草素類化合物和菜薊苦素的方法。

背景技術(shù)

朝鮮薊為菊科菜薊屬多年生草本植物，又名菜薊、洋薊、菊薊、荷花百合、法國(guó)百合，學(xué)名Cynara scolymus L.。原產(chǎn)于地中海沿岸，歐洲南部及北非，19世紀(jì)由法國(guó)傳入中國(guó)上海，現(xiàn)主要分布在上海、浙江、云南、湖南、山東及北京等地。朝鮮薊食用價(jià)值極高，有“蔬菜之皇”的美譽(yù)。

朝鮮薊葉提取物長(zhǎng)期以來(lái)一直用于民間醫(yī)藥，其體外和臨床試驗(yàn)表明，朝鮮薊提取物具有抗氧化、抑菌、抗癌抗腫瘤、保肝、降血糖、改善消化及改善高膽固醇血癥等功效，愈創(chuàng)木烷半倍萜內(nèi)酯作為其主要功效成分有望被開(kāi)發(fā)為治療炎癥性疾病(如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、特異性抗乙型肝炎病毒、II型糖尿病相關(guān)的新型PTP-1B抑制劑、血管生成抑制劑和治療多種癌癥的新藥物以及促進(jìn)胃動(dòng)力和治療胃潰瘍的新藥物。

木犀草素是3',4',5,7-四羥基黃酮類化合物，其B環(huán)中的鄰二酚羥基對(duì)黃酮類化合物的抗氧化活性起主要作用，它是朝鮮薊中含量豐富，是主要的抗氧化成分，具有抗腫瘤、心臟保護(hù)作用、呼吸系統(tǒng)影響、免疫調(diào)節(jié)、抗炎作用。近年來(lái)，天然中草藥活性成分的抗肝細(xì)胞癌作用成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，相關(guān)的研究表明木犀草素在抗肝細(xì)胞癌方面有多機(jī)制、多途徑、多靶點(diǎn)的作用。

但是現(xiàn)有技術(shù)對(duì)于其有效成分的分離純化研究有限，導(dǎo)致朝鮮薊的深度開(kāi)發(fā)利用難以開(kāi)展。如何從朝鮮薊中提取出愈創(chuàng)木烷半倍萜內(nèi)酯等生物活性成分，對(duì)深度開(kāi)發(fā)朝鮮薊作物極其重要。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種提取木犀草素類化合物和菜薊苦素的方法，從朝鮮薊中提取出目標(biāo)化合物，而且快速有效、純度高。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

一種提取木犀草素類化合物和菜薊苦素的方法，所述方法包括以下步驟:

A.將朝鮮薊粉碎后用乙醇水溶液浸提后得到粗提液；

B.所述粗提液上樣至AB-8型大孔樹(shù)脂層析柱，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為20％、50％、80％的乙醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集洗脫液，濃縮凍干得到第一粗提物和第二粗提物；

C.所述第一粗提物用甲醇水溶液溶解后上樣至RP-C18層析柱，依次用體積分?jǐn)?shù)為30％、48％和100％的甲醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集洗脫液，濃縮凍干得到第一預(yù)分離物和第二預(yù)分離物；

D.將所述第一預(yù)分離物用乙腈水溶液溶解，使用Venusil MP C18色譜柱、以流動(dòng)相A為乙腈、流動(dòng)相B為甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行第一液相半制備，收集流分段，濃縮凍干得到第一目標(biāo)化合物和第二目標(biāo)化合物，所述第一目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

所述第二目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：