[發(fā)明專(zhuān)利]提取木犀草素類(lèi)化合物和菜薊苦素的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811457222.0
• 申請(qǐng)日: 2018-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109320571B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王元清;曹清明;李群;王蔚婕;李安平
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中南林業(yè)科技大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07H17/07
• 分類(lèi)號(hào): C07H17/07;C07H1/08;C07D307/93
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 趙志遠(yuǎn)

1.一種提取木犀草素類(lèi)化合物和菜薊苦素的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟:

A.將朝鮮薊粉碎后用乙醇水溶液浸提后得到粗提液；

B.所述粗提液上樣至AB-8型大孔樹(shù)脂層析柱，依次用水、體積分?jǐn)?shù)為20％、50％、80％的乙醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集洗脫液，濃縮凍干得到第一粗提物和第二粗提物；

C.所述第一粗提物用甲醇水溶液溶解后上樣至RP-C18層析柱，依次用體積分?jǐn)?shù)為30％、48％和100％的甲醇水溶液進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜檢測(cè)，收集洗脫液，濃縮凍干得到第一預(yù)分離物和第二預(yù)分離物；

D.將所述第一預(yù)分離物用乙腈水溶液溶解，使用Venusil MP C18色譜柱、以流動(dòng)相A為乙腈、流動(dòng)相B為甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行第一液相半制備，收集流分段，濃縮凍干得到第一目標(biāo)化合物和第二目標(biāo)化合物，所述第一目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

所述第二目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

其中，所述流動(dòng)相B中甲酸水溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.1％；

所述第一液相半制備的洗脫梯度為：初始-40分鐘，所述流動(dòng)相A與所述流動(dòng)相B的體積比為23:77；45分鐘-55分鐘，所述流動(dòng)相A與所述流動(dòng)相B的體積比為100:0；

E.將所述第二粗提物和所述第二預(yù)分離物用乙醇水溶液重結(jié)晶，然后用體積分?jǐn)?shù)為50％的甲醇水溶液溶解，使用Venusil MP C18色譜柱、以流動(dòng)相C為乙腈、流動(dòng)相D為甲酸水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行第二液相半制備，收集流分段，濃縮凍干得到第三目標(biāo)化合物，所述第三目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)式為：

其中，所述流動(dòng)相D中甲酸水溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.1％；所述第二液相半制備的洗脫梯度為：初始-40分鐘，所述流動(dòng)相C與所述流動(dòng)相D的體積比為27:73；41分鐘-50分鐘，所述流動(dòng)相C與所述流動(dòng)相D的體積比為100:0。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AB-8型大孔樹(shù)脂層析柱的制作方法為：先將AB-8型大孔樹(shù)脂顆粒用無(wú)水乙醇浸泡20-24h進(jìn)行預(yù)處理，然后裝柱，用水沖洗至無(wú)醇味。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述RP-C18層析柱的制備方法為：將RP-C18顆粒放入甲醇中進(jìn)行超聲處理，并不斷攪拌，去除氣泡；然后將處理好的所述RP-C18顆粒和甲醇一同裝柱。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述RP-C18顆粒的規(guī)格為：40-60μm，

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述Venusil MP C18色譜柱的規(guī)格為：10mm×250mm，5μm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟E中，所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為50％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟A中：所述朝鮮薊與所述乙醇水溶液的料液比為1：8-10，浸提時(shí)間為70-72h。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述步驟A中乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為70％。