[發(fā)明專利]一種蒲菜多糖脫蛋白脫色的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811456405.0 | 申請日： | 2018-11-30 |
| 公開（公告）號： | CN109535274B | 公開（公告）日： | 2021-02-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王曉莉;史雨琪;袁志香;王云鵬;熊清平 | 申請（專利權(quán)）人： | 淮陰工學(xué)院 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00 |
| 代理公司： | 淮安市科文知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 32223 | 代理人： | 謝觀素 |
| 地址： | 223005 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 多糖 蛋白 脫色 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種蒲菜多糖脫蛋白脫色的方法，即采用離子交換樹脂螯合金屬離子后脫除蒲菜多糖中的蛋白質(zhì)和色素：首先通過金屬離子(Zn2+)螯合LKC100型樹脂，再用螯合后的樹脂在最佳吸附參數(shù)下吸附蒲菜多糖中的蛋白質(zhì)和色素。該方法不僅不消耗任何有毒有害的有機溶劑，而且脫蛋白脫色性能好，多糖保留率高，操作安全方便，脫蛋白脫色時間短，效率高。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于分離純化技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種在蒲菜多糖提取過程中脫蛋白脫色的方法。
背景技術(shù)
多糖具有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和多方面的生物活性。近年來因其在免疫調(diào)節(jié)、抗癌抗病毒等方面表現(xiàn)出顯著的藥理活性而逐漸被人們重視，并廣泛應(yīng)用于腫瘤化療。然而多糖中常伴隨蛋白質(zhì)、色素等雜質(zhì)，阻礙多糖的純化分級、結(jié)構(gòu)鑒定和藥理活性分析。因此如何盡量多地去除蛋白質(zhì)、色素等雜質(zhì)同時盡可能地保留多糖成為研究多糖的突出性問題。
蒲菜多糖來源于蛋白質(zhì)豐富的食用蒲菜，其多糖中蛋白質(zhì)雜質(zhì)的質(zhì)量濃度高達1.13%。因此，必須采用適當?shù)姆椒▽⑵涞鞍踪|(zhì)充分脫除后才能進行進一步開發(fā)。然而，依照經(jīng)典Sevage法脫蛋白，消耗了大量的氯仿和正丁醇，產(chǎn)生大量有毒有機污染物，難以商業(yè)化生產(chǎn)蒲菜多糖，并且由于高含量的有毒有機溶劑殘留，此方法也不適合食品和制藥等領(lǐng)域的應(yīng)用。因此開發(fā)一種在蒲菜多糖提取過程中新型環(huán)保的脫蛋白脫色方法是非常有必要的。
發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供解決上述問題的一種在蒲菜多糖提取過程中脫蛋白脫色的方法，整個過程不使用任何有機溶劑，綠色無污染，脫蛋白率、脫色率高，多糖保留率高，操作安全、方便，時間短，效率高。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：
一種蒲菜多糖脫蛋白脫色的方法，利用離子交換樹脂螯合金屬離子后在蒲菜多糖提取過程中脫除蛋白質(zhì)和色素；其工藝步驟包括：
（1）蒲菜多糖提取：取新鮮食用蒲菜榨成汁，汁液過濾去渣，離心、收集上清減壓旋蒸濃縮至原體積的1/4，加入3倍體積的無水乙醇振蕩混勻，置于冰箱4 ℃靜置過夜，次日離心棄上清，加適量去離子水復(fù)溶沉淀后充分混合，減壓旋蒸以去除殘留乙醇，即得蒲菜多糖溶液，4 ℃避光保存?zhèn)溆茫?/p>
（2）Zn2+螯合樹脂的制作：稱取硫酸鋅于錐形瓶中，溶于去離子水，攪拌混勻后加入LKC100型樹脂，硫酸鋅與去離子水按重量體積比g/ml為1:40，硫酸鋅：樹脂重量比1：1，混合液置于恒溫搖床中震蕩，再用濾布過濾混合液，濾出Zn2+螯合樹脂，用蒸餾水沖洗至上清液無肉眼可見雜質(zhì)，即為Zn2+螯合樹脂；
（3）脫色脫蛋白處理：
靜態(tài)吸附法：用去離子水將步驟（1）中的蒲菜多糖溶液稀釋至1.0~2.5 mg mL -1，將步驟（2）所得Zn2+螯合樹脂與稀釋后的蒲菜多糖溶液以體積比1：10混合，在恒溫氣浴搖床中振蕩一定時間，用濾布過濾分離樹脂和蒲菜多糖溶液，濾液即為脫色脫蛋白蒲菜多糖溶液；
或動態(tài)吸附法：用去離子水將步驟（1）中的蒲菜多糖溶液稀釋至1.0~2.5 mg mL-1，將步驟（2）所得Zn2+螯合樹脂濕法裝柱，以一定的上樣徑高比和上樣流速進行動態(tài)吸附。
本發(fā)明進一步改進技術(shù)方案是，靜態(tài)吸附法最佳參數(shù)為：在30 ℃恒溫氣浴搖床中120 rpm min -1振蕩30~60 min。用200目濾布過濾分離樹脂和蒲菜多糖溶液。
本發(fā)明進一步改進技術(shù)方案是，動態(tài)吸附法最佳參數(shù)為：樹脂上樣徑高比為1:15~20，以0.75~2.5 BV h -1流速進行動態(tài)吸附20 min，然后用兩倍體積的去離子水淋洗，合并脫蛋白脫色的蒲菜多糖溶液和去離子水洗脫液。
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