[發(fā)明專(zhuān)利]一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV及方法和應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811455838.4 | 申請(qǐng)日： | 2018-11-30 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN109536462A | 公開(kāi)（公告）日： | 2019-03-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 楊廣孝;王全穎 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 楊廣孝;王全穎 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N7/01 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N7/01;C12N15/62;C12N15/63;A61K38/16;A61P35/00;A61P3/10;A61P9/10 |
| 代理公司： | 成都眾恒智合專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 51239 | 代理人： | 劉華平 |
| 地址： | 130000 吉林*** | 國(guó)省代碼： | 吉林;22 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 表達(dá)肽 分泌表達(dá) 基因治療 復(fù)合肽 柔性連接子 拼接 效應(yīng)性 信號(hào)肽 心腦血管疾病 重組表達(dá)盒 融合表達(dá) 疑難疾病 重組病毒 方法學(xué) 內(nèi)含子 順?lè)醋?/a> 治療肽 終止子 應(yīng)用 腫瘤 融合 聯(lián)合 | ||
1.一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，包含信號(hào)肽-人工內(nèi)含子-第一表達(dá)肽-拼接序列1-拼接序列2-第二表達(dá)肽-拼接序列3-第三表達(dá)肽-順?lè)醋又亟M表達(dá)盒；或者包含信號(hào)肽-第一表達(dá)肽-(GGGGS)3(柔性連接子-第二表達(dá)肽-柔性連接子-第三表達(dá)肽-終止子的融合表達(dá)盒)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表達(dá)肽為P53N端15肽，第二表達(dá)肽為37aa的P73激動(dòng)肽，第三表達(dá)肽為P53C端22肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表達(dá)肽為HRALI S-iRGD，第二表達(dá)肽為Shesherdin-iRGD肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表達(dá)肽為PR39，第二表達(dá)肽為T(mén)hymosin beta 4。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表達(dá)肽為NTA8肽(NAPVSIPQ)，第二表達(dá)肽為43aa的Thymosin β4 Ac-SDKP-GS-GLP_1序列肽，第三表達(dá)肽為BDNF受體結(jié)合肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表達(dá)肽是抗抗Aβ(1-42)肽的微小抗體(scFv)；所述第二表達(dá)肽是ABAD-Dp Aβ相關(guān)乙醇脫氫酶阻斷肽(ABAD decoy peptide，ABAD-DP)即ABAD的LD拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)環(huán)的92-120aa區(qū)，含有能與Aβ結(jié)合的區(qū)域；第三表達(dá)肽為Humanin。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表達(dá)肽為BDNF受體loop2界面激動(dòng)肽B3和B5；第二表達(dá)肽為Ac-SDKP-GLP-1(32-36)HA2-TAT；第三表達(dá)肽為exendin439肽。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV，其特征在于，重組表達(dá)盒中包含有編碼信號(hào)肽的信號(hào)肽核酸序列；所述信號(hào)肽核酸序列位于核酸片段上游，下游插入有內(nèi)含子和拼接子序列目的肽序列。
9.一種利用如權(quán)利要求1-8任意一項(xiàng)所述的能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV控制分泌表達(dá)方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1：確定治療疾病目標(biāo)，選定靶點(diǎn)基因；
步驟2.確定使用的目的肽片段；
步驟3.將所述目的肽片段插入到載體，從而實(shí)現(xiàn)內(nèi)含子-拼接子控制分泌表達(dá)。
10.權(quán)利要求1所述的一種能實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)復(fù)合肽的scAAV在制備抗腫瘤藥物、治療糖尿病藥物、治療心腦血管栓塞缺血缺氧性疾病藥物中的應(yīng)用。
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