[發明專利]一種榛子離體培養技術

在審

• 申請號: 201811448057.2
• 申請日: 2018-11-29
• 公開（公告）號: CN109349114A
• 公開（公告）日: 2019-02-19
• 發明（設計）人: 王小宇;王露
• 申請（專利權）人: 廣西玉林玖旺農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G17/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 盧翔飛

本發明公開了一種榛子離體培養技術，榛子為世界四大名果之一，共同特征是堅硬的外果皮，里面含著油質的可食果肉，有豐富的營養價值，在我國均有栽培。榛子通過植物細胞培養技術獲得單倍體的育種方法，以榛子為外植體，經過外植體預處理、愈傷組織誘導、不定芽分化、生根培養、煉苗移栽等過程從而建立了榛子離體培養技術體系，為開展榛子新品種選育提供新材料。

技術領域

本發明涉及植物生物技術中單倍體育種方法，具體地說，涉及一種榛子離體培養技術。

背景技術

榛子分布在我國黃河以北省份地區為主，江淮一帶也有發展，最近也有移植我國南方種植。榛子為世界四大名果之一，共同特征是堅硬的外果皮，里面含著油質的可食果肉，有豐富的營養價值。榛子是一種用途廣，經濟價值較高的樹種。果肉可做巧克力糖果，果殼可制活性炭原料，樹皮可制鞣皮物質和烤膠，樹葉可養蠶，木材可用制手杖等，利用花藥離體培養技術可在短時間內獲得性狀豐富的單倍體或純合的二倍體植株，從而縮短育種周期，提高選擇效率，為進一步開展榛子育種工作提供新材料。

發明內容

本發明的目的在于提供出一種榛子離體培養技術，本發明以榛子為外植體，經過外植體預處理、愈傷組織誘導、不定芽分化、生根培養、煉苗移栽等過程從而建立了榛子離體培養技術體系，從而實現了本發明的目的。

本發明的一種榛子離體培養技術，包括以下的步驟：

步驟1，花蕾選擇及處理：晴朗天氣早上取健壯植株上的花蕾，用改良品紅染色鏡檢花粉發育時期，選擇小孢子發育處于單核靠邊期的花粉作為外植體,花蕾采摘后先在10℃條件下進行低溫預處理12天后備用；

步驟2，花愈傷組織誘導：將步驟1處理后的花蕾先用洗潔精水溶液浸泡20min，然后用自來水沖洗40min，擦干表面水分后在超凈工作臺中以70%～80%乙醇浸泡20s，0.1%升汞溶液消毒40min，再用無菌水清洗10次后置于無菌濾紙上用已消毒的鑷子和解剖針剖開花蕾，取出花藥并接種于花藥誘導培養基上進行愈傷組織誘導,接種后置于每天光照20小時，光照強度為2000lx，培養溫度為27℃的條件下培養直至形成愈傷組織；花誘導培養基為：MS+0.45mg/L6-BA+4mg/L2,4-D+6.0%蔗糖+1.0%瓊脂+0.8%活性炭，pH值為5.8;

步驟3，不定芽分化：將步驟2形成的愈傷組織轉接于分化培養基中進行不定芽分化誘導,接種后先在27℃條件下全暗培養16天，然后置于每天光照13小時，光照強度為2600lx，培養溫度為27℃的條件下培養直至形成不定芽；分化培養基為：MS+6mg/L KT+3mg/L NAA+21mg/L AgNO₃+5.6%蔗糖+1.0%瓊脂+0.8%活性炭，pH值為5.8;

步驟4，生根培養：將步驟3所獲得的高度約為6cm的不定芽切割并接種到生根培養基上進行生根培養，接種后先在27℃條件下全暗培養12天，然后置于每天光照18小時，光照強度為3000lx，培養溫度為27℃的條件下培養至生根；生根培養基為：1/2MS+2mg/L NAA+3mg/LIBA+5.5%蔗糖+1.0%瓊脂+0.8%活性炭，pH值為5.8;

步驟5，煉苗移栽：待幼苗長至幾條短的白根后置于自然光照下煉苗12天后，洗凈根部培養基，移栽由營養土：沙土：蛭石=3:2:1混合成的基質,置于光照培養箱內培養，每天以1/4MS大量元素營養液給幼苗澆水，保持濕度,待幼苗成活后再移栽大田。

與現有技術相比本發明的優點是：本發明通過植物細胞培養技術獲得單倍體的育種方法。以榛子為外植體，經過外植體預處理、愈傷組織誘導、不定芽分化、生根培養、煉苗移栽等過程從而建立了榛子離體培養技術體系，為開展白榛子新品種選育提供新材料。

具體實施方式

以下實施例是對本發明的進一步說明，不是對本發明的限制。

實施例1：