[發明專利]一種核桃組織培養再生體系構建方法在審
| 申請號： | 201811447129.1 | 申請日： | 2018-11-29 |
| 公開（公告）號： | CN109302988A | 公開（公告）日： | 2019-02-05 |
| 發明（設計）人： | 王小宇;王露 | 申請（專利權）人： | 廣西玉林玖旺農業科技有限公司 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00;A01C1/08 |
| 代理公司： | 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109 | 代理人： | 盧翔飛 |
| 地址： | 537024 廣西壯族自治區玉林*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 核桃 組織培養再生體系 構建 補血 愈傷組織誘導 步驟構建 分化培養 技術獲得 生根培養 未成熟胚 無性快繁 遺傳轉化 優質種苗 中醫應用 種子消毒 株性穩定 長壽果 外植體 益智果 堅果 煉苗 潤肺 種苗 移栽 無毒 醫學 | ||
1.一種核桃組織培養再生體系構建方法，其特征在于包括以下步驟：
步驟1，種子消毒：選擇未成熟果子，去葉后于洗衣粉水浸泡42min，刷凈后自來水沖洗2h，取出尚未成熟的乳白或略帶棕色的種子，在超凈工作臺中，剝開外種皮，先用75%乙醇消毒36s后用無菌水洗10次，再用0.1%升汞溶液消毒32min，用無菌水沖洗10次后備用；
步驟2，胚愈傷組織誘導：將經步驟（1）處理后未成熟種胚切成0.5cm×0.5cm×0.5cm接種到誘導培養基上,先在25～28℃條件下全暗培養48天，然后置于每天光照16小時，光照強度為3200lx，直至誘導形成胚性愈傷組織；誘導培養基為：ER+6-BA6mg/L+NAA1.5mg/L+GA37 mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5.2g/L，pH為5.8；
步驟3，分化培養：將步驟（2）培養獲得的呈綠色的子葉愈傷組織轉入分化培養基上進行分化培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養18天，然后置于每天光照16小時，光照強度為5600lx，置于培養溫度為25～28℃的條件下培養直至形成叢生芽；分化培養基為：ER+6-BA5.2mg/L+IBA1.5mg/L+蔗糖35g/L+瓊脂7.2g/L，pH為5.8；
步驟4,生根培養：將步驟（3）過程獲得的高度約為4.5cm的叢生芽分切接種到生根培養基上進行生根培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養15天，然后置于每天光照16小時，光照強度為3500lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養至生根；生根培養基為：1/2MS+IBA1.2mg/L+GGR2.2mg/L+KT3.2mg/L+蔗糖35g/L+瓊脂7.2g/L，pH為5.8；
步驟5，煉苗移栽：將步驟（4）獲得的高約12cm的生根試管苗去瓶蓋置于自然光照下煉苗10天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土和粘土混合成的基質中并定植于大田中。
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