[發(fā)明專利]一種快速繁殖水生植物水鱉優(yōu)質種苗的方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811441591.0
• 申請日: 2018-11-29
• 公開（公告）號: CN109287490B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設計）人: 周長芳;張宸榮;潘璠;仲昭朝
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 胡錫瑜

1.一種快速繁殖水鱉優(yōu)質種苗的方法及其應用，其特征在于由以下步驟組成：

(1)脫毒母本的獲得

從野外自然濕地中采集水鱉植株少量，剪取帶有分蘗芽的莖段，于洗滌液中浸洗0.5～2h后，用自來水沖洗干凈，在超凈工作室中，用70％～75％乙醇浸泡不超過3min，改用含0.2％～1％有效氯的NaClO溶液或1～5％的H₂O₂消毒液浸泡消毒10s～5min或0.05％～1％的HgCl₂消毒液浸泡消毒1～30min，再用無菌水徹底漂洗干凈，將材料進一步切割整理后接種于裝有已滅菌培養(yǎng)液①的三角瓶中，并以透氣封口膜封口，置于專用組培架上培養(yǎng)，維持平均光照強度1000～5000lx，每日光照8～12h，室內溫度20～30℃，一個月后挑出有新芽長出且無細菌生長的材料即水鱉脫毒母本，所述培養(yǎng)液①為：1/2～1倍的MS+10～40g/L的蔗糖+0.5～3.0mg/L的細胞分裂素KT或6-BA+0.1～1.0mg/L的生長素IAA或IBA,調pH至5.6～6.2之間；

(2)叢生芽的擴增

取上述步驟1所得水鱉脫毒母本，于無菌操作臺上轉接入已滅菌的培養(yǎng)液②中，將三角瓶放回原組培架上培養(yǎng)15～30d，待水鱉叢生芽基本長滿整瓶時取出，每1～3芽切割分瓶，并繼續(xù)擴繁，所述培養(yǎng)液②為：1/2～1倍的MS+10～40g/L的蔗糖+0.5～3.0mg/L的細胞分裂素KT或6-BA+0.1～1.0mg/L的生長素IAA或IBA+5～10％的椰子汁,調pH至5.6～6.2之間；

(3)生根與完整植株的誘導

取上述步驟(2)所得水鱉叢芽，于無菌操作臺上以每1～2個芽切割分離，轉接入已滅菌的培養(yǎng)液③中，將三角瓶放回原組培架上培養(yǎng)15～30d，等待瓶中水鱉生根并形成完整幼苗，所述培養(yǎng)液③為：1/4～1倍的MS+7.5～30g/L的蔗糖+0.01～0.5mg/L的生長素NAA或IBA,調pH至5.6～6.2之間；

(4)壯苗與移栽

將上述步驟(3)所得水鱉幼苗從三角瓶中取出，若準備應用于室內水族缸中，則根據水族缸栽培的無菌要求，先以無菌水、去離子水或自來水沖洗以去除材料表面殘余培養(yǎng)液，然后在無菌或有菌條件下將組培苗投入水族缸中即可，若準備應用于濕地公園建設或濕地生態(tài)恢復室外大型工程，則將組培苗先過自來水沖洗，清除MS和激素殘余后轉入含稀釋Hoagland營養(yǎng)液的開放水培箱中，并置于溫室或室外壯苗2～4周，初期若遇室外光照過強，用遮陽網擋去1/2太陽光，3～7d后組培苗能完全適應自然光，水鱉組培苗的大規(guī)模移栽采用兩種方式，其一為直接拋撒入自然水體使其漂浮生長，初期以圍欄圈圍防止其漂走，其二為先栽入以塘泥、泥炭土為主要成分的基質中，然后再移入淺水水體，這樣定植更快，但初栽時水位深度不超過1m。

2.權利要求1所述一種水鱉優(yōu)質種苗的組培快繁方法在室內水族觀賞布景或室外濕地公園建設或大型濕地生態(tài)修復工程中的應用。