[發明專利]一種麥盧卡蜂蜜的鑒別方法

在審

• 申請號: 201811434717.1
• 申請日: 2018-11-28
• 公開（公告）號: CN109270182A
• 公開（公告）日: 2019-01-25
• 發明（設計）人: 嚴麗娟;徐敦明;賴國銀;薛曉鋒;張潔;林立毅;張志剛;張峰
• 申請（專利權）人: 海峽兩岸農產品檢驗檢疫技術廈門中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廈門市精誠新創知識產權代理有限公司 35218
• 代理人: 劉小勤

本發明涉及一種麥盧卡蜂蜜的鑒別方法，該方法采用基于液相色譜/高分辨質譜的代謝物組學技術對國產蜂蜜和麥盧卡蜂蜜的代謝組進行全面獲取與分析，結合多元統計分析方法，通過建立PLS?DA模型，實現對蜂蜜蜜種是否為麥盧卡蜂蜜的鑒別。本發明所述的麥盧卡蜂蜜的鑒別方法，可以有效避免主觀因素的干擾，而且靈敏度和準確性顯著提升。而且，運用液相色譜/高分辨質譜對蜂蜜樣本進行檢測，前處理較為簡單，可以同時處理數十個樣品，分析通量大大提高。所建數據庫可以進行擴展，隨著樣本信息的不斷加入，PLS?DA鑒別模型的準確度將會進一步提高，從而實現鑒別方法自身在使用過程中不斷自動優化，越測越準確。

技術領域

本發明涉及蜂蜜檢測方法，尤其是一種麥盧卡蜂蜜的鑒別方法。

背景技術

麥盧卡蜂蜜被譽為新西蘭“國寶”，在世界上享有盛譽。麥盧卡是新西蘭的一種天然茶樹，麥盧卡蜂蜜是蜜蜂采集這種茶樹花釀制而成的蜜。麥盧卡蜂蜜中含有“獨麥素”活性抗菌成分，其健康益處備受國人追捧。自然，任何標注為麥盧卡標識的蜂蜜價格不菲。然而，并非所有進口產品都是貨真價實。早在2013年，麥盧卡蜂蜜的質量問題就曾被推上輿論的風口浪尖，被曝光弄虛作假。有統計顯示，麥盧卡蜂蜜的年產量不過1700噸，但全球市場上以“麥盧卡”名義售出的新西蘭蜂蜜卻高達1萬噸，造假現象顯而易見。國內不法廠家以普通花蜜進行罐裝假冒麥盧卡蜂蜜，攫取高額利益。

蜂蜜花種的鑒定通常采用基于花粉表征的蜂蜜孢粉學分析方法，輔以感官和理化分析。然而，花粉鑒定對技術水平的要求較高，且有時會給出錯誤結果，還有可能無法區分近似物種。現有的對蜂蜜摻假進行鑒別的方法有：穩定碳同位素比值分析法、薄層色譜法、脈沖電流檢測器的高效陰離子交換色譜法、氣相色譜質譜聯用技術、高效液相色譜法、高效液相同位素質譜儀聯用技術、核磁共振技術以及近紅外光譜技術等。我國的不法廠家以普通花蜜進行罐裝假冒麥盧卡蜂蜜，攫取高額利益。傳統方法大多數針對蜂蜜中數目有限的指標進行檢測，真實屬性識別往往無從入手，因此亟須具有可預測性和非目標性的檢測技術對真實屬性進行有效鑒定。

中國專利申請CN108614000A提供了一種基于SIMCA模型的麥盧卡蜂蜜鑒別方法。該專利是基于核磁共振(NMR)代謝組學技術。核磁共振和質譜(MS)是目前代謝組學領域的主流方法。相對于核磁共振靈敏度低、檢測動態范圍窄等弱點，高分辨質譜具有較高的質量分辨率、靈敏度和專屬性，可以實現對成千上萬化合物的同時快速分析與鑒定。而且，高分辨質譜可以與液相色譜實現聯用，兼備液相色譜的高分離度、高通量及質譜的普適性、高靈敏度和特異性。蜂蜜中除了糖類物質以外，其他小分子代謝物的含量非常低。由于本身原理的限制，核磁共振的靈敏度難以滿足代謝物全譜檢測的要求。而且，蜂蜜的組成復雜，僅僅依靠核磁共振無法對代謝物進行有效分離和準確鑒定。液相色譜/高分辨質譜聯用技術的靈敏度遠遠高于核磁共振，針對蜂蜜代謝組能夠獲得更好的覆蓋率。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有的麥盧卡蜂蜜鑒別方法的不足，提供一種靈敏度高、準確性好，且可以大批量快速完成麥盧卡蜂蜜鑒別的方法。

發明人經研究發現，蜂蜜的組成成分除了葡萄糖和果糖外，還含有大量的小分子代謝物，包括植物代謝物和蜜蜂代謝物。利用光譜和質譜技術同時檢測多種成分并配合統計學方法進行分析，是一種非常有潛力的蜜源甄別方法。本發明采用基于液相色譜/高分辨質譜的代謝物組學技術對國產蜂蜜和麥盧卡蜂蜜的代謝組進行全面獲取與分析，建立PLS-DA模型，從而實現了對麥盧卡蜂蜜鑒別。

具體方案如下：

一種麥盧卡蜂蜜的鑒別方法，包括以下步驟：

步驟A1：收集麥盧卡商品化樣本作為麥盧卡蜂蜜樣本集S1；

步驟A2：收集不同種類的國產蜂蜜作為非麥盧卡蜂蜜樣本集S2；

步驟A3：將麥盧卡蜂蜜樣本集S1中的樣本和非麥盧卡蜂蜜樣本集S2中的樣本進行前處理，提取小分子代謝物，并分別利用液相色譜/高分辨質譜采集代謝組數據；