[發明專利]一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法

在審

• 申請號: 201811433190.0
• 申請日: 2018-11-28
• 公開（公告）號: CN109575131A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 魯江徽;劉峰;謝龍生
• 申請（專利權）人: 必歐瀚生物技術（合肥）有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18
• 代理公司: 合肥天明專利事務所(普通合伙) 34115
• 代理人: 趙瑜;金凱

1.一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，以PSG3重組蛋白作為免疫原免疫兔子獲得抗血清，再將血清經過親和層析純化獲得高純度的多抗，其特征在于：所述的免疫共4次，包括初次免疫和3次加強免疫，所述初次免疫是將PSG3重組抗原和弗氏完全佐劑1:1乳化后進行免疫，所述加強免疫的前兩次是將PSG3重組抗原和弗氏不完全佐劑1:1乳化后進行免疫，第三次加強免疫是將PSG3重組抗原直接注射免疫。

2.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述初次免疫和/或加強免疫時所取的PSG3重組抗原的量為1.5-3mg。

3.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述初次免疫和/或前兩次加強免疫的注射方式為兔子背部多點皮下注射。

4.根據權利要求1或3所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述第三次加強免疫的注射方式為兔子耳緣靜脈注射。

5.根據權利要求1或2所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述初次免疫和/或加強免疫時注射的計量為0.3-0.8mL。

6.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述4次免疫的每次免疫間隔時間為8-12天。

7.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述免疫的兔子為新西蘭大白兔，雌性，初次免疫時體重在1.5-2.0kg。

8.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述乳化為完全乳化，乳化后的抗原滴在冷水上經久不散。

9.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述抗血清的獲取步驟為，對免疫完成的兔子進行心臟取血，將全血在37℃條件下靜置1h，再置于2-8℃條件下靜置過夜，吸取上清即為兔抗血清，全程無菌操作。

10.根據權利要求1所述的一種妊娠特異性糖蛋白3的兔多克隆抗體的制備方法，其特征在于：所述親和層析方法為采用rProienG親和柱配套純化儀進行抗體純化。