[發(fā)明專利]一種蔗糖水解酶突變體及其制備方法與應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811425686.3 | 申請(qǐng)日: | 2018-11-27 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN109486793B | 公開(kāi)(公告)日: | 2020-08-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 吳敬;宿玲恰;郭志勇;李玲玲;姚鍇琳 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 江南大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12N9/24 | 分類號(hào): | C12N9/24;C12P19/14;C12P19/04 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人: | 張勇 |
| 地址: | 214000 江*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 蔗糖 水解 突變體 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種蔗糖水解酶突變體,其特征在于,所述蔗糖水解酶突變體與氨基酸序列如SEQID NO.1所示的蔗糖水解酶相比,第271位絲氨酸殘基突變?yōu)榱吮彼釟埢?/p>
2.編碼權(quán)利要求1所述蔗糖水解酶突變體的基因。
3.攜帶權(quán)利要求2所述基因的載體。
4.攜帶權(quán)利要求2所述基因的重組細(xì)胞。
5.制備權(quán)利要求1所述蔗糖水解酶突變體的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)在蔗糖水解酶氨基酸序列上確定突變位點(diǎn);設(shè)計(jì)定點(diǎn)突變的突變引物,以攜帶蔗糖水解酶基因的載體為模板進(jìn)行定點(diǎn)突變;構(gòu)建含突變體的質(zhì)粒載體;
(2)將突變體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)宿主細(xì)胞;
(3)挑選陽(yáng)性克隆進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),并純化蔗糖水解酶突變體。
6.根據(jù)權(quán)利要5所述的方法,其特征在于,所述質(zhì)粒載體為pUC系列,pET系列,或pGEX中的任意一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述宿主細(xì)胞為細(xì)菌或真菌細(xì)胞;所述的細(xì)菌為革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽(yáng)性菌。
8.權(quán)利要求1所述的蔗糖水解酶突變體在生產(chǎn)多聚糖中的應(yīng)用。
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