[發明專利]一種液態發酵生產富硒杏鮑菇菌種的方法

有效

• 申請號: 201811422986.6
• 申請日: 2018-11-27
• 公開（公告）號: CN109280632B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 谷玉秋;沙淼;高雪
• 申請（專利權）人: 貴州貴旺生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/14;C12N13/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京成實知識產權代理有限公司 11724
• 代理人: 葉立濤

1.一種液態發酵生產富硒杏鮑菇菌種的方法，其特征在于，該方法的工藝步驟包括：

步驟1、杏鮑菇菌種的活化

將保藏的杏鮑菇菌種接種到PDA培養基斜面上，置于25℃培養箱中恒溫培養3~4d，再轉接到新鮮的PDA培養基斜面上，置于25℃培養箱中恒溫培養，菌絲長滿斜面后待用；

步驟2、杏鮑菇種子液的制備

將活化的杏鮑菇菌絲塊切割成0.5~1cm²小塊，無菌條件下接種到裝有100mL種子液培養基的250mL錐形瓶中，每瓶放入3塊，先置于25℃培養箱中恒溫培養2d，再置于搖床上振蕩培養4~6d，得到杏鮑菇種子液；種子液培養基的配方為：馬鈴薯180~220g/L，葡萄糖10~14g/L，麥芽糖6~8g/L， 番茄汁20~30mL/L，牛肉膏1~2g/L，KH₂PO₄ 0.9~1.1g/L，MgSO₄ 0.4~0.6g/L，CaCl₂ 0.3~0.5g/L，pH自然；

步驟3、杏鮑菇種子液超聲波電場組合處理

將種子液先進行超聲波輻照處理，超聲頻率為28kHz，功率為30W，超聲30s間歇10s，一共處理45min；然后將種子液放置于60KV/m的均勻電場中處理2min；

步驟4、杏鮑菇的液體初級發酵

按照9%~11%的接種量將上述種子液接種到裝有200mL初級發酵培養基的500mL錐形瓶中，置于搖床上振蕩培養4~6d，得到杏鮑菇初級發酵液；初級發酵培養基的配方為：葡萄糖30~34g/L，玉米粉21~25g/L，胡蘿卜7~10g/L，花生粕3~4g/L，米糠2.1~2.3g/L，茶籽粕2.5~3.1g/L，海藻粉1.7~2.5g/L，大豆油0.5~0.7mL/L，生育酚4~5 mg/L，ZnSO₄ 300~350mg/L，KNO₃ 0.8~1.2g/L，三十烷醇1.4~1.8mg/L，KH₂PO₄ 1.8~2.2g/L，MgSO₄ 0.9~1.1g/L，pH值為6.0~6.4；

步驟5、杏鮑菇的液體富硒發酵

采用氣升式發酵罐，將富硒發酵培養基配制好后裝入發酵罐內，裝料系數為65%~75%，通入空氣攪拌1~2 min，混合均勻，然后密封蓋口，高壓蒸汽滅菌1h，滅菌完成后，等到發酵罐內培養基溫度降至30℃以下時，按照9%~11%的接種量將杏鮑菇初級發酵液從接種口接入發酵罐內，發酵培養5~7d，獲得富硒杏鮑菇液體菌種；富硒發酵培養基的配方為：可溶性淀粉20~26g/L，燕麥麩皮18~24g/L，紅糖6~10g/L，平菇菌糠6.6~8.0g/L，玉米芯2.2~3.0g/L，豆粕粉5.5~6.5g/L，富硒酵母粉2.6~3.0g/L，苦蕎皮殼5.9~6.5g/L，胡麻莖桿粉3.3~3.9g/L，KH₂PO₄ 1.8~2.2g/L，MgSO₄ 0.9~1.1g/L，醋酸鈉 0.5~0.7g/L，Na₂SeO₃ 28~32mg/L，氰鈷胺50~60mg/L，棕櫚酸1.8~2.4g/L，初始pH值為6.4~6.6。

2.按照權利要求1所述的一種液態發酵生產富硒杏鮑菇菌種的方法，其特征在于，所述步驟3中，超聲波輻照處理采用的設備為CY-5D超聲波生物促進生長儀。

3.按照權利要求1所述的一種液態發酵生產富硒杏鮑菇菌種的方法，其特征在于，所述步驟2和步驟4中搖床振蕩培養的溫度為24~26℃，轉速為145~155r/min。

4.按照權利要求1所述的一種液態發酵生產富硒杏鮑菇菌種的方法，其特征在于，所述步驟5中發酵培養參數為：培養溫度24~26℃，攪拌機轉速155~165r/min，前2d通氣量為1:1V/V·min，后3~5d通氣量為1:0.5V/V·min。