[發(fā)明專利]一種從板藍根中提取分離新葡萄糖蕓苔素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811412805.1
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN111217874B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發(fā)明（設計）人: 程志紅;郭啟慧
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C07H15/26
• 分類號: C07H15/26;C07H1/08
• 代理公司: 上海元一成知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

本發(fā)明屬于中藥提取分離技術領域，具體涉及一種從板藍根中提取新葡萄糖蕓苔素的方法。所述方法包括以下步驟：粉碎；含水醇浸泡；熱回流提取；DEAE?Sephadex?A?25凝膠富集；脫鹽、濃縮；75C₁₈?OPN柱色譜分離；Sephadex?LH?20柱色譜純化；濃縮冷凍干燥。該方法條件溫和，不破壞1?甲基?3?吲哚基硫苷的結構。操作簡單，適于大量制備。制備的新葡萄糖蕓苔素純度高。

技術領域

本發(fā)明屬于中藥提取分離技術領域，具體涉及一種從板藍根中提取新葡萄糖蕓苔素(俗名Neoglucobrassicin，化學名N-Methoxy-3-indolylmethylglucosinolate)的方法。

背景技術

現(xiàn)有技術公開了板藍根是十字花科菘藍屬植物菘藍Isatis?indigotica?Fort.的干燥根，味苦寒，具有清熱解毒，涼血利咽之功效，是一種傳統(tǒng)的抗病毒中藥。現(xiàn)代藥理學對板藍根的研究表明，其具有良好的抗炎、抗病毒、解熱以及提高免疫力等多種作用。硫代葡萄糖苷(glucosinolates,GLs,簡稱硫苷)作為板藍根中一類重要的活性成分，被報道具有抗癌、抑菌、抗氧化等多種生物活性，從而受到學者的廣泛關注，因此從中提取分離硫苷對板藍根中硫苷類成分的深入研究具有重要意義。

基于現(xiàn)有技術的現(xiàn)狀與基礎，本申請的發(fā)明人擬提供一種從板藍根中提取分離新葡萄糖蕓苔素的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種從板藍根中提取分離新葡萄糖蕓苔素(俗名Neoglucobrassicin，化學名N-Methoxy-3-indolylmethylglucosinolate)的方法，本方法通過加熱回流法提取、DEAE?SephadexA-25柱色譜富集、75C₁₈-OPN柱色譜分離制備、Sephadex?LH-20凝膠柱色譜純化，制得以下結構的硫苷；

經(jīng)鑒定，所獲硫苷類成分其結構如下述：

具體的，本發(fā)明的從板藍根中提取分離新葡萄糖蕓苔素的方法，其包括步驟：

(1)粉碎：將板藍根藥材打粉；

(2)浸泡：向步驟(1)所得板藍根粉末中加入五倍體積的70％乙醇水溶液浸泡過夜；

(3)提取：將步驟(2)中板藍根的醇水溶液加熱回流提取2.5小時，過濾收集藥材提取液，藥渣中再次加入五倍體積70％乙醇水溶液浸泡12小時，再次加熱回流提取2.5小時，過濾收集藥材提取液，合并兩次所得提取液；

(4)富集：將步驟(3)中所得提取液用處理過的DEAE?SephadexA-25凝膠裝填的色譜柱進行富集分離，經(jīng)過吸附平衡、洗脫、解吸，得富集液；

(5)脫鹽、濃縮：向步驟(4)所得富集液中加入兩倍體積95％乙醇水，-4度靜置30分鐘，離心得上清液，濃縮；

(6)分離：將步驟(5)所得總硫苷提取液用處理過的75C₁₈-OPN裝填的色譜柱進行富集分離，經(jīng)過吸附平衡、洗脫、解吸，得新葡萄糖蕓苔素洗脫液；

(7)純化：將步驟(6)所得新葡萄糖蕓苔素洗脫液濃縮，用處理過的Sephadex?LH-20裝填的色譜柱進行純化，以甲醇為流動相洗脫得新葡萄糖蕓苔素洗脫液；(8)濃縮冷凍干燥：將步驟(7)中所得新葡萄糖蕓苔素洗脫液濃縮至干，冷凍干燥得高純度新葡萄糖蕓苔素。

本發(fā)明中，所述DEAE?SephadexA-25預處理過程是，兩倍柱體積0.5M乙酸鈉緩沖溶液沖洗色譜柱。