[發(fā)明專利]一種臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811409240.1
• 申請(qǐng)日: 2018-11-23
• 公開（公告）號(hào): CN109316373A
• 公開（公告）日: 2019-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張權(quán)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京安溢生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K8/64
• 分類號(hào): A61K8/64;A61K8/99;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08;A61P17/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 趙麗娜

本發(fā)明涉及細(xì)胞因子化妝品領(lǐng)域，具體而言，涉及一種臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用。一種臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法，包括以下步驟：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)；換液，繼續(xù)培養(yǎng)，至細(xì)胞長滿至85％?95％，收集培養(yǎng)液，得到含有大量臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的因子的培養(yǎng)液；所述培養(yǎng)液過濾去除細(xì)胞碎片，得到含有所述臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的液體。本發(fā)明提供的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法，經(jīng)適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)后，細(xì)胞因子含量豐富，方法簡便。得到的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物，能由內(nèi)而外激活皮膚細(xì)胞，從真皮層改善皮膚功能，由本及面，改善效果能夠更加持久。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞因子化妝品領(lǐng)域，具體而言，涉及一種臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSC)是中胚層來源的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的多能干細(xì)胞。MSC廣泛存在于全身多種組織中，幾乎來源于機(jī)體所有的組織器官，如骨髓、骨膜、脂肪組織、牙髓、滑膜、臍帶、胎盤、羊水及胎兒組織等。不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞具有相似的形態(tài)，表達(dá)相同的表面標(biāo)記，具有相似的生物學(xué)特性方面，如可在體外培養(yǎng)擴(kuò)增，并能在特定條件下分化為包括神經(jīng)細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、脂肪細(xì)胞在內(nèi)的多組織系統(tǒng)的細(xì)胞。MSC除了具有多向組織細(xì)胞分化能力之外，還在造血、免疫炎癥反應(yīng)、血管新生等人體重要功能中起重要調(diào)節(jié)作用。

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSC)是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞。臍帶間充質(zhì)是一類低免疫原性細(xì)胞，且具有很強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)功能。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞擁有MSC的全部特性，并且含量豐富，易于分離培養(yǎng)。

與其他來源的MSC相比，UC-MSC更原始，是介于胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞之間的干細(xì)胞，其增殖和分化能力比胚胎干細(xì)胞低，但明顯高于成體干細(xì)胞。

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有多分化潛能，在特定的誘導(dǎo)條件下，UC-MSC不僅能分化為骨、軟骨、脂肪、肌腱等中胚層細(xì)胞，而且能夠向內(nèi)胚層組織細(xì)胞(如心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞)和外胚層組織細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞)分化。UC-MSC不具致瘤性，能在不同的誘導(dǎo)條件及合適的體內(nèi)生長微環(huán)境中，安全地定向分化為不同的組織細(xì)胞系，具有修復(fù)各種組織和器官的能力。

UC-MSC除了能分化為組織細(xì)胞修復(fù)組織損傷外，還有一個(gè)重要的功能就是旁分泌細(xì)胞因子進(jìn)行組織修復(fù)，如分泌神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)因子、血管新生因子、造血支持因子、免疫調(diào)節(jié)因子、抗凋亡因子和趨化因子等。在UC-MSC高表達(dá)的因子中，G-CSF、GM-CSF、HGF、LIF、IL-11屬于造血因子，有促進(jìn)造血作用。HGF、IL-1α、IL-6、IL-8屬于免疫調(diào)節(jié)因子。還有EGF、FGF、VEGF、TGF-β、KGF等多種能夠調(diào)節(jié)皮膚功能的活性因子。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法，該方法得到的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物主要含有表皮生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、角質(zhì)細(xì)胞生長因子(KGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等，該細(xì)胞因子復(fù)合物對(duì)皮膚具有顯著的改善作用。

本發(fā)明的第二目的在于提供臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物在改善皮膚狀態(tài)中的應(yīng)用，使用后皮膚更新加快，變得細(xì)膩、有光澤，鼻頭、T區(qū)毛孔明顯變小，眼角皺紋減少，法令紋變淺，經(jīng)儀器檢測(cè)紫外線色斑變淡，棕色斑變淡。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

一種臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞因子復(fù)合物的制備方法，包括以下步驟：

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)；

換液，繼續(xù)培養(yǎng)，至細(xì)胞長滿至85％-95％，收集培養(yǎng)液，得到含有大量臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的因子的培養(yǎng)液；