[發(fā)明專利]一種復(fù)合菌制劑的生產(chǎn)方法及其在污水處理中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811407400.9
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109234214A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周春松
• 申請（專利權(quán)）人: 宜興市永潔環(huán)保設(shè)備有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C12R1/07
• 代理公司: 杭州橙知果專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33261
• 代理人: 朱孔妙

本發(fā)明提供一種復(fù)合菌制劑的生產(chǎn)方法及其在污水處理中的應(yīng)用，具體地，所述復(fù)合菌制劑包括轉(zhuǎn)基因海洋兼性芽孢桿菌25份、趨磁細(xì)菌9份、棒狀美麗鹽菌2.5份、解淀粉鹽顆粒型菌3.8份、鹽生枝芽胞桿菌2.5份、運(yùn)動節(jié)枝桿菌5份、鹽反硝化枝芽孢桿菌6.5份、反硝化卡斯特蘭尼氏菌2份，本發(fā)明提供的復(fù)合菌制劑除具備耐鹽特性還同時具有較強(qiáng)的硝氮、氨氮去除效果，適用于高鹽廢水的處理。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及污水處理領(lǐng)域，特別地涉及一種復(fù)合菌制劑的生產(chǎn)方法及其在污水處理中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

海水的鹽度在3％左右，工業(yè)上把鹽度和海水相當(dāng)甚至超過海水的廢水稱為高鹽廢水。紡織印染、化工生產(chǎn)過程、食品加工以及農(nóng)藥生產(chǎn)過程中都會排放大量的高鹽廢水。目前對高鹽廢水的處理可分為物理化學(xué)法和生物法兩大類，由于此類廢水的溶解性有機(jī)物含量高，一般物理、化學(xué)方法難以處理并且處理成本高，而生物法具有經(jīng)濟(jì)、高效、無害的特點(diǎn)，是首選的處理方法。

高鹽廢水中所含大量的氯離子，會對微生物的生長產(chǎn)生抑制，使微生物細(xì)胞脫水；使脫氫酶活性降低，對細(xì)胞產(chǎn)生毒害作用；同時由于水的密度增加，活性污泥容易上浮流失。這些對高鹽廢水的傳統(tǒng)生化處理產(chǎn)生了不利的影響。普通活性污泥通過一定時間的耐鹽馴化可用于處理高鹽廢水，但是馴化周期長，耐沖擊負(fù)荷能力弱，處理效果無法滿足實(shí)際需求。

目前篩選出的耐鹽微生物多為針對COD降解的功能菌株，缺乏針對氨氮，特別是硝氮去除的耐鹽硝化菌和耐鹽反硝化菌。本發(fā)明提供一種復(fù)合菌制劑的生產(chǎn)方法及其在污水處理中的應(yīng)用，所述復(fù)合菌制劑具有高耐鹽特性，并具有較強(qiáng)的硝氮、氨氮去除效果，適用于高鹽廢水的處理。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種復(fù)合菌制劑的生產(chǎn)方法及其在污水處理中的應(yīng)用。

本發(fā)明是以如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明提供一種經(jīng)基因改造獲得具有高耐鹽特性的細(xì)菌，并使該細(xì)菌同時具有較強(qiáng)的硝氮、氨氮去除效果，適用于高鹽廢水的處理，并將上述細(xì)菌與其他菌種制成新型水凝膠載體復(fù)合菌制劑，所述水凝膠載體復(fù)合菌制劑系統(tǒng)體積小，相對有效生物量大，儲存條件要求低，在實(shí)際應(yīng)用時，現(xiàn)場定量可根據(jù)污水量進(jìn)行水凝膠載體復(fù)合菌制劑系統(tǒng)的疊加，便于操作，適用于多種高鹽污染場景。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對本發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。

實(shí)施例1：獲得耐鹽基因

地中海富鹽菌(Haloferax mediterranei)菌株購自中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏號CGMCC1.3716。前期研究證明該菌具有較強(qiáng)的耐鹽性，雖然其具有較強(qiáng)的除鹽作用，但是其不易培養(yǎng)并且不具備除碳、除硫、除氨氮等功能，不能直接應(yīng)用于高鹽廢水的處理中。

為了挖掘地中海富鹽菌的耐鹽相關(guān)基因，探索其耐鹽的分子機(jī)制，提取其基因組DNA進(jìn)行全基因組測序，基因組測序委托南京金斯瑞公司通過SOLEXA測序平臺完成，利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)(E.coli DH5a)構(gòu)建鹽脅迫后地中海富鹽菌的cDNA文庫，具體方法為：分別利用超聲隨機(jī)打斷基因組DNA至250bp、500kb、1.0kb、1.5kb的片段，將DNA片段與接頭連接，之后250bp和500bp文庫進(jìn)行PCR擴(kuò)增，上機(jī)測序，1.0kb和1.5kb大片段文庫采用Cre-LoxRecombination建庫技術(shù)構(gòu)建，在DNA大片段兩端連接LoxP接頭后再進(jìn)行環(huán)化、測序；按照基因組構(gòu)建步驟分別構(gòu)建插入片段為250bp，500bp，1.0kb，1.5kb的片段插入文庫。