[發明專利]一種復合菌制劑的生產方法及其在污水處理中的應用

在審

• 申請號: 201811407400.9
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109234214A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 周春松
• 申請（專利權）人: 宜興市永潔環保設備有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C12R1/07
• 代理公司: 杭州橙知果專利代理事務所(特殊普通合伙) 33261
• 代理人: 朱孔妙

1.一種復合菌制劑的生產方法，其特征在于，所述復合菌制劑包括轉基因海洋兼性芽孢桿菌、趨磁細菌、棒狀美麗鹽菌、解淀粉鹽顆粒型菌、鹽生枝芽胞桿菌、運動節枝桿菌、鹽反硝化枝芽孢桿菌、反硝化卡斯特蘭尼氏菌。

2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述轉基因海洋兼性芽孢桿菌的制備方法包括：挖掘地中海富鹽菌的耐鹽相關基因，提取其基因組 DNA進行全基因組測序，利用大腸桿菌表達系統構建鹽脅迫后地中海富鹽菌的cDNA文庫，將上述插入外源基因的大腸桿菌接種至不同鹽濃度的LB培養基進行耐鹽測試，于28℃培養一周，觀察其生長情況，挑取生長旺盛的菌落進行純培養，劃線培養若干次直至獲得單克隆，挑取10個長勢旺盛的克隆進行測序，獲得耐鹽基因AQE1、AQE2、AQE3、AQE4、AQE5、AQE6、AQE7、AQE8、AQE9、AQE10，合成上述耐鹽基因并分別轉入海洋兼性芽孢桿菌感受態細胞中，將上述插入外源基因的海洋兼性芽孢桿菌分別接種至NaCl濃度為25%的LB液體培養基，于28℃培養5天，驗證獲得除鹽效果最好的菌株為轉入AQE7核苷酸序列的海洋兼性芽孢桿菌。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述AQE7的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述復合菌制劑用于制備新型水凝膠載體復合菌制劑系統，具體地為，按質量份數，先將50份氫氧化鈉溶于水中，并加入50份丙烯酸進行預處理；再依次加入聚丙烯酸鈉20份、玉米淀粉10份、丙烯酰胺10份和碳酸鈣2.5份，攪拌加溫反應后，加入引發劑進行接枝聚合反應；然后將反應獲得的初級液體放入滅菌鍋中滅菌至室溫，之后向初級液體中加入復合菌制劑混懸液及光引發劑，攪拌均勻后倒入平流器皿，弱紫外線照射10分鐘使其凝膠化，即得新型水凝膠載體復合菌制劑系統。