[發明專利]一種獲得腫瘤特異性T細胞受體的方法

在審

• 申請號: 201811404330.1
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109485721A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 杜學明
• 申請（專利權）人: 杜學明
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/12;C12N5/0783;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.從T細胞中獲得TCR的方法，包括以下步驟：首先，獲得抗原肽特異性T細胞中T細胞受體基因序列；然后，根據抗原肽特異性T細胞受體基因序列制備得到抗原肽特異性T細胞受體；

所述抗原肽特異性T細胞，來自利用抗原肽治療后免疫反應陽性和/或腫瘤癥狀緩解的腫瘤患者。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述T細胞為CD8陽性T細胞；

和/或，所述抗原肽特異性T細胞利用四聚體方法從所述腫瘤患者外周血中分選得到。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述腫瘤患者含有EGFR L858R突變，所述腫瘤患者的HLA分型為A1101，所述抗原肽為序列表中序列1所示的多肽；

所述腫瘤患者含有EGFR 746_750DEL突變，所述腫瘤患者的HLA分型為A0301，所述抗原肽為序列表中序列6所示的多肽；

所述腫瘤患者含有TP53G105V突變，所述腫瘤患者的HLA分型為A3101，所述抗原肽為序列表中序列11所示的多肽；

所述腫瘤患者含有OR5L2G108V突變，所述腫瘤患者的HLA分型為A0206，所述抗原肽為序列表中序列16所示的多肽；

所述腫瘤患者含有ATM S2408L突變，所述腫瘤患者的HLA分型為B4001，所述抗原肽為序列表中序列21所示的多肽。

4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述腫瘤為實體腫瘤。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述實體腫瘤為肺腺癌、結直腸癌、胃癌、肝癌或胰腺癌。

6.根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述獲得抗原肽特異性T細胞中T細胞受體基因序列通過單細胞測序實現。

7.抗原肽特異性T細胞的制備方法，包括下述X1)或X2)：

X1)利用抗原肽對腫瘤患者進行治療，得到治療后的腫瘤患者；從所述治療后的腫瘤患者中篩選出免疫反應陽性和/或腫瘤癥狀減緩的患者，利用所述抗原肽從所述免疫反應陽性和/或腫瘤癥狀減緩的患者外周血中分選得到所述抗原肽特異性T細胞；

X2)利用權利要求1-6中任意所述方法獲得抗原肽特異性T細胞受體基因，將抗原肽特異性T細胞受體基因導入T細胞并使所述抗原肽特異性T細胞受體基因得到表達，得到重組細胞，即為抗原肽特異性T細胞。

8.下述任一產品：

M1、利用權利要求1-6中任一所述方法制備的抗原肽特異性T細胞受體；

M2、與M1所述抗原肽特異性T細胞受體相關的生物材料，下述B1)至B5)中的任一種：

B1)編碼所述抗原肽特異性T細胞受體的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表達盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重組載體、或含有B2)所述表達盒的重組載體；

B4)含有B1)所述核酸分子的重組微生物、或含有B2)所述表達盒的重組微生物、或含有B3)所述重組載體的重組微生物；

B5)含有B1)所述核酸分子的轉基因細胞系、或含有B2)所述表達盒的轉基因細胞系；

M3、利用權利要求7所述方法制備的抗原肽TCR-T細胞；

M4、藥物組合物，含有利用權利要求1-6中任一所述方法制備的抗原肽特異性T細胞受體；

M5、藥物組合物，含有利用權利要求7所述方法制備的抗原肽TCR-T細胞。