[發明專利]一種同時檢測甲、乙型流感、副流感的PCR試劑盒

在審

• 申請號: 201811402860.2
• 申請日: 2018-11-23
• 公開（公告）號: CN109957624A
• 公開（公告）日: 2019-07-02
• 發明（設計）人: 張鵬
• 申請（專利權）人: 張鵬
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

產品名稱：甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）技術領域：本發明涉及分子生物學領域，具體涉及一種用于檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒的試劑盒及其使用方法。技術問題：三種病毒均屬于呼吸道病毒，癥狀非常相似，只是強弱稍有差別。市售檢測單項病原體的產品無法滿足快速檢測、區分三種病原體的需求。技術方案：按照熒光PCR法原理，根據三種病毒的核酸序列特點，挑選其各自的特異性保守序列并設計相應的引物及TaqMan熒光探針。主要用途：本試劑盒用于家禽的泄殖腔拭子、氣管、肺、脾或淋巴等組織以及患者的咽拭子等樣本中，同時對上述三種病毒核酸進行定性檢測。

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，具體涉及一種用于檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒的試劑盒及其使用方法。

背景技術

流感病毒（influenza virus）屬于正粘病毒科（Orthomyxoviridae），為單鏈RNA膜病毒。流感病毒結構自外而內可分為包膜、基質蛋白以及核心三部分。流感病毒顆粒外膜有兩種類型表面糖蛋白，一型為血細胞凝集素(H)，分為 15個亞型，一型為神經氨酸酶(N)，分為9個亞型。它分為甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起的。

其中，甲型流感病毒根據H和N抗原不同，又分為許多亞型，H可分為17個亞型（H1～H17），N有10個亞型（N1～N10）。其中僅H1N1、H2N2、H3N2主要感染人類，其中H1、H5、H7亞型為高致病性。甲型流感病毒最容易發生變異，對人類致病性高，曾多次引起世界性大流行。流感的傳染源主要是病人，其次是隱性感染者，以空氣飛沫傳播為主，其次是通過病毒污染的茶具、食具、毛巾等間接傳播，密切接觸也是傳播流感的途徑之一。病人自發病后5d內均可從鼻涕、口涎、痰液等分泌物排出病毒，傳染期約1周，以病初2～3d傳染性最強。 感染后的癥狀主要表現為高熱、咳嗽、流涕、肌痛等，多數伴有嚴重的肺炎，嚴重者心、腎等多種臟器衰竭導致死亡，病死率很高。而肺炎是最常見的并發癥。

乙型流感病毒僅在人之間傳播，呈暴發或小流行，不引起世界性流感大流行。乙型和甲型流感的臨床癥狀相似，但是甲型流感病毒導致的住院率四倍于乙型流感病毒。乙型流感通常有肌炎及胃腸道癥狀。乙型流感病毒的抗原變異很慢。如果H和N都發生了大的變異，便產生了新的亞型（質變），如1957年H2N2（甲2亞型）、1968年以后的H3N2（甲3亞型）。

副流感病毒屬副粘病毒屬，也為單鏈RNA，有4個型，其中I～III型較為常見，嬰幼兒易感染，IV型較為少見。I型所致的疾病譜很廣，有喉氣管支氣管炎、毛細支氣管炎、支氣管炎和肺炎；II型感染可出現典型的下呼吸道感染癥狀，但在非免疫抑制或無合并慢性病的兒童中，喉氣管支氣管炎是最常見的疾病；III型主要引起毛細支氣管炎和肺炎，新生兒和小嬰兒的感染病僅次于呼吸道合胞病毒。潛伏期一般1～7天。副流感病毒的傳染源也主要為患者和隱性患者，傳播途徑主要為飛沫傳播。

可見，三種病毒均屬于呼吸道病毒，傳染源、傳播途徑和感染后癥狀等都非常相似，只是強弱稍有差別。而市面上檢測單項病原體的產品無法滿足快速檢測、區分三種病原體的需求。基于以上情況，對這三種病原體快速檢測區分的需求越來越高，因此，為了更加準確和快速診斷，有必要建立一種能夠同時靈敏、特異和高效檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒的檢測手段。

分子診斷技術可以滿足對甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒快速診斷的需求，并且由于它們的遺傳物質都為核糖核酸，樣本提取后都需要進行逆轉錄過程，再進行分子檢測，所以本試劑盒可以對這三種病原體同時進行檢測，能夠快速、準確地進行病原體篩選，從而配合以正確的治療，減少抗生素藥物的濫用。

發明內容

本發明要解決的技術問題是，提供一種可同時快速檢測甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒三種病原體的試劑盒。