[發明專利]免疫測定方法、用于鑒定免疫測定的系統和試劑盒

在審

• 申請號: 201811401329.3
• 申請日: 2016-11-22
• 公開（公告）號: CN109470866A
• 公開（公告）日: 2019-03-15
• 發明（設計）人: 楊陽;趙衛國;張向輝
• 申請（專利權）人: 博陽生物科技（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N21/76
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 劉建軍;吳大建

1.一種試劑盒，包括第一抗體(或抗原)包被的發光微粒、標記物標記的第二抗體(或抗原)、標記物特異結合物標記的感光微粒，其特征在于，所述試劑盒的使用方法包括如下步驟：(1)對含待測目標抗原(或抗體)的待測樣本進行化學發光免疫反應，激發和記錄化學發光的第一次和第二次讀數，并將第二次和第一次讀數之間的差值增幅記為A，(2)根據含待測目標抗原(或抗體)的已知的一系列標準物質的第一次讀數和兩次讀數的增幅A’分別做標準曲線；(3)將含待測目標抗原(或抗體)的待測樣本的第一次讀數和兩次讀數的增幅A與標準曲線進行比較，來確定樣本的濃度。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的使用方法包括如下步驟：

(a1)將含待測目標抗原(或抗體)的待測樣本與第一抗體(或抗原)包被的發光微粒、標記物標記的第二抗體(或抗原)混合，溫育得混合液；

(a2)第一次讀數：在步驟(a1)的混合液中再加入標記物特異結合物標記的感光微粒，溫育后進行激發光照射并檢測發射光量，光子計數器讀數，計為RLU1；

(a3)第二次讀數：將步驟(a2)中進行第一次讀數后的反應溶液進一步溫育后，再進行激發光照射并檢測發射光量，光子計數器讀數，計為RLU2；

(a4)計算樣本第二次讀數所得信號值相對于第一次讀數所得信號值的增幅A，A＝(RLU2/RLU1-1)×100％；

(a5)根據含待測目標抗原(或抗體)的已知的一系列標準物質的兩次讀數的增幅A’做標準曲線；

(a6)通過A值確定待測物質濃度是在標準曲線的上升區間或者是在下降區間，再將待測樣本的RLU1代入其對應的標準曲線計算濃度。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，發光微粒是指填充有發光化合物和鑭系元素化合物的高分子微粒；所述感光微粒是填充有感光化合物的高分子微粒，在紅色激光激發下，可以產生單線態氧離子。

4.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，步驟(a2)和(a3)中，以600～700nm的紅色激發光照射，檢測反應溶液的發射光量；發射光的檢測波長為520～620nm。

5.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述抗原是指具有免疫原性的物質；所述抗體是指機體產生的能識別特定外來物的免疫球蛋白；所述第一抗體和第二抗體指可特異性結合于所述目標抗原的抗體；所述第一抗原和第二抗原指可特異性結合于所述目標抗體的抗原。