[發明專利]一種人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的免疫測定方法及其系統

有效

• 申請號: 201811401320.2
• 申請日: 2016-11-22
• 公開（公告）號: CN109470873B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 楊陽;趙衛國;張向輝
• 申請（專利權）人: 科美博陽診斷技術（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/76
• 分類號: G01N33/76;G01N33/58;G01N21/76
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 劉建軍;吳大建

1.一種人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的免疫測定方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：(1)對含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的待測樣本進行光激化學發光反應，激發和記錄化學發光的第一次和第二次讀數，并將第二次和第一次讀數之間的差值增幅記為A，(2)根據含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的已知的一系列標準物質的兩次讀數的增幅A’做標準曲線，其中標準物質的濃度低于產生HOOK效應的濃度；(3)如果含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的待測樣本的兩次讀數的增幅A大于所述標準曲線的最大值，則對樣品進行稀釋后再進行測定。

2.根據權利要求1所述的免疫測定方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(a1)將含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的待測樣本與第一抗體包被的發光微粒、標記物標記的第二抗體混合，溫育得混合液；

(a2)第一次讀數：在步驟(a1)的混合液中再加入標記物特異結合物標記的感光微粒，溫育后進行激發光照射并檢測發射光量，光子計數器讀數，計為RLU1；

(a3)第二次讀數：將步驟(a2)中進行第一次讀數后的反應溶液進一步溫育后，再進行激發光照射并檢測發射光量，光子計數器讀數，計為RLU2；

(a4)計算樣本第二次讀數所得信號值相對于第一次讀數所得信號值的增幅A，A＝(RLU2/RLU1-1)×100％；

(a5)根據含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的已知的一系列標準物質的兩次讀數的增幅A’做標準曲線，其中標準物質的濃度低于產生HOOK效應的濃度；

(a6)如果含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的待測樣本的兩次讀數的增幅A大于所述標準曲線的最大值，則對樣品進行稀釋后再進行測定。

3.根據權利要求1所述的免疫測定方法，其特征在于，所述標準物質是陽性對照。

4.根據權利要求2所述的免疫測定方法，其特征在于，發光微粒是指填充有發光化合物和鑭系元素化合物的高分子微粒；所述感光微粒是填充有感光化合物的高分子微粒，在紅色激光激發下，可以產生單線態氧離子。

5.根據權利要求2所述的免疫測定方法，其特征在于，步驟(a2)和(a3)中，以600～700nm的紅色激發光照射，檢測反應溶液的發射光量；發射光的檢測波長為520～620nm。

6.根據權利要求2所述的免疫測定方法，其特征在于，所述抗體是指機體產生的能識別特定外來物的免疫球蛋白；所述第一抗體和第二抗體指可特異性結合于所述人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的抗體。

7.一種用于鑒定人絨毛膜促性腺激素及β亞單位免疫測定的系統，所述系統包括：

免疫反應裝置，其用于實施光激化學發光反應，

光激化學發光反應激發和計數裝置，其用于激發和記錄化學發光的第一次和第二次讀數，并將第二次和第一次讀數之間的差值增幅記為A，

處理器，其用于根據含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的已知的一系列標準物質的兩次讀數的增幅A’做標準曲線，其中標準物質的濃度低于產生HOOK效應的濃度；如果含人絨毛膜促性腺激素及β亞單位的待測樣本的兩次讀數的增幅A大于所述標準曲線的最大值，則對樣品進行稀釋后再進行測定。