[發明專利]一種由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素及制備方法與應用

有效

• 申請號: 201811398516.0
• 申請日: 2018-11-22
• 公開（公告）號: CN109593790B
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發明（設計）人: 鄧毛程;李靜;陳維新;王瑤;栗瑞敏;段迪;容志恒;謝杰文;吳豐裕
• 申請（專利權）人: 廣東輕工職業技術學院;鄧毛程;李靜
• 主分類號: C12P1/04
• 分類號: C12P1/04;C09B61/00;C12R1/07
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;裘暉

1.一種由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）活化凝結芽孢桿菌；

（2）生物表面活性劑的發酵：將發酵培養基置于發酵罐中，滅菌，冷卻后將步驟（1）活化的凝結芽孢桿菌接種至發酵培養基中，啟動攪拌，通入無菌空氣，控制攪拌轉速、通氣比和溫度，發酵；

（3）生物表面活性劑的獲得：用截留分子量為30 kDa的超濾膜對發酵液進行第一次超濾，設定濃縮比，收集第一次透過液；用無菌水稀釋第一次超濾所得的濃縮液，再用截留分子量為30 kDa的超濾膜進行第二次超濾，設定濃縮比，收集第二次透過液；將兩次收集的透過液合并，用截留分子量為360 Da的超濾膜進行第三次超濾，設定濃縮比，收集濃縮液；

（4）植物油脂萃取生物表面活性劑：在無菌條件下，將步驟（3）獲得的濃縮液與植物油脂混合均勻，然后靜置，待分層趨于穩定后，排出下層的液體，取上層的萃取液；

（5）油溶性紅曲色素的制備：將步驟（4）所得的萃取液和醇溶性紅曲色素混合，攪拌均勻，得到油溶性紅曲色素；

步驟（1）中所述的凝結芽孢桿菌為凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans) NY008，于2018年9月12日保藏于位于廣東省廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓的廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No：60444；

步驟（2）中所述的發酵培養基的組成如下：檸檬酸鈉20～40 g/L、蛋白胨5～10 g/L、KH₂PO₄ 2～2.5 g/L、MgSO₄?7H₂O 0.4～0.5 g/L，pH6.8～7.0；

步驟（2）中所述的攪拌的轉速為30～90 rpm；

步驟（2）中所述的通氣比為0.10～0.30 vvm；

步驟（2）中所述的溫度為38～40℃；

步驟（2）中所述的發酵的時間為6～8天。

2.根據權利要求1所述的由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于：

步驟（1）中所述的活化的步驟如下：將凝結芽孢桿菌菌種接種于搖瓶培養基中，于38～40℃、以20～80 rpm的轉速培養至對數生長期。

3.根據權利要求2所述的由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于：

所述的搖瓶培養基的成分如下：葡萄糖 30 g/L、酵母膏 5 g/L、蛋白胨 5 g/L、KH₂PO₄2 g/L、MgSO₄?7H₂O 0.5 g/L，pH6.8～7.0；

所述的培養的時間為12～14 h。

4.根據權利要求1所述的由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于：

步驟（2）中所述的接種的接種量為1%～10%（v/v）。

5.根據權利要求1所述的由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于：

步驟（3）中所述的第一次超濾中的濃縮比為（8～10）：1；

步驟（3）中所述的第二次超濾中的濃縮比為（8～10）：1；

步驟（3）中所述的第三次超濾中的濃縮比為（3～4）：1。

6.根據權利要求1所述的由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于：

步驟（4）中所述的植物油脂的用量按植物油脂：濃縮液=體積比1：1配比計算；

步驟（4）中所述的植物油脂為花生油和大豆油中的一種或兩種；

步驟（4）中所述的混合的條件為于2000～4000 rpm的轉速攪拌5～15min。

7.根據權利要求1所述的由醇溶性紅曲色素制成的油溶性紅曲色素的制備方法，其特征在于：

步驟（5）中所述的醇溶性紅曲色素的用量按1～3 g醇溶性紅曲色素/L濃縮液計算。