[發明專利]一種從海洋微藻中提取多不飽和脂肪酸的方法

在審

• 申請號: 201811388031.3
• 申請日: 2018-11-21
• 公開（公告）號: CN109468168A
• 公開（公告）日: 2019-03-15
• 發明（設計）人: 李鐸;李珊;李克磊;郭曉飛;趙峰
• 申請（專利權）人: 青島大學
• 主分類號: C11B1/10
• 分類號: C11B1/10;C11C1/02
• 代理公司: 青島高曉專利事務所(普通合伙) 37104
• 代理人: 黃曉敏

本發明屬于海洋生物提取技術領域，涉及一種從海洋微藻中提取多不飽和脂肪酸的方法，先將海洋微藻粉加入氯仿和甲醇混合溶液中，再超聲波浸提將得到的液體過濾后轉移至分液漏斗，當上下分離液面出現明顯且上層澄清后，收集下層有機溶液于圓底燒瓶中，并水浴蒸干后用氯仿洗滌，再將圓底燒瓶轉移至螺蓋玻璃管中，用氮氣吹干氯仿得到的脂質；然后將得到的脂質加入甲醇、尿素進行富集包合反應；包合結束后迅速過濾取濾液，旋蒸除去甲醇，加入鹽酸維持酸性環境，再加入正己烷萃取上層，然后用氯化鈉溶液除雜取上層直至呈中性；最后加入無水氯化鈉干燥，得到高純度的多不飽和脂肪酸；其制備工藝簡單，操作方便，成本低，提取的多不飽和脂肪酸純度高。

技術領域：

本發明屬于海洋生物提取技術領域，尤其涉及一種從海洋微藻中提取多不飽和脂肪酸的方法。

背景技術：

海洋藻類是一種重要的海洋資源，富含多種脂肪酸，尤其是多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFAs)。脂類產品中的多不飽和脂肪酸，特別是n-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFAs)，對維持人體營養均衡和人類慢性病的調節方面有著重要作用，是維持人體健康的必要營養素之一。隨著工業發展，當今人類對于n-3多不飽和脂肪酸的攝入量普遍較小，因此制備相應的高濃度脂肪酸補充品迎合人們的需要。

目前我國大規模工業生產中，脂肪酸尤其是多不飽和脂肪酸，基本來源于深海魚油。例如CN201611146665.9提供了一種利用鱈魚內臟制備高純度海產多不飽和脂肪酸磷脂的方法，采用高效溶劑提取、快速凈化、超聲強化超臨界萃取、聚苯乙烯凝膠柱層析等工藝，具有環保、節能、高效的優勢，利用鱈魚加工下腳料，提取到高純度的海產多不飽和脂肪酸磷脂，提取過程操作簡便，提取效率高；磷脂的純度大于等于97％，方面解決大量剩余海洋副產物資源的浪費問題，減少環境污染；另一方面豐富了磷脂的制備來源，且原料來源廣泛廉價，降低了磷脂提取成本，具有重要的生態、經濟和社會意義；CN96109525.3一種提取魚油中腦黃金方法，該方法包括將魚油皂化，酯化和用超臨界流體萃取法制備腦黃金二十二碳六烯酸酯(DHA)和二十碳五烯酸酯(EPA)，該方法提取的腦黃金純度高，產率高，不含有害溶劑，工藝操作簡單，萃取速度快，適用于工業化生產。但是，面對市場需求的擴大，傳統魚油已經不足以支撐產業發展。魚油中的不飽和脂肪酸中含有較多的膽固醇，與健康飲食、特別是慢性病的預防互相違背，而且魚油提取物腥味較重，容易引發使用者、特別是海鮮過敏者的不適。相對于魚油脂肪酸，海洋微藻中提取的脂肪酸無異味、且不含膽固醇，一些藻類中的不飽和脂肪酸含量遠遠高于魚油，且所含種類較純，便于分析。從藻類中提取富含不飽和脂肪酸的脂質資源，為海洋微藻深加工提供了奠定了基礎。CN201510833765.8公開了一種微藻干藻粉直接皂化提取脂肪酸的方法，包括直接皂化法提取微藻脂肪酸的步驟。采用直接皂化獲得的脂肪酸可占微藻油脂含量15％以上，與兩步提取脂肪酸中脂肪酸占微藻油脂含量的12％相比，脂肪酸提取率有所提高，且直接皂化法操作工藝簡單，容易控制，溶劑回收率高，環境污染小，成本低，可促進微藻PUFAs的綜合利用，促進微藻產業發展；CN201310622315.5公開了一種脂肪酸的提取方法屬，按照以下步驟進行：(1)原料海帶的前處理：把采集到的海帶用水沖洗,再經蒸餾水浸泡、清洗,然后涼干備用，對涼干的海帶進行粉碎過篩,原料粒度取值范圍分別為為150-200；(2)海帶總脂質的索氏提取法：海帶樣品經過篩后,放在折好的濾紙筒內,在索氏提取器內用石油醚于65～75℃恒水溫中回流提取6～8h得到脂肪酸，海帶的質量與石油醚的體積比為30～40g/L；(3)利用溶劑與溶液的沸點不同的原理，加溫提取溶劑，使用20-40目的分子膜過濾后，加入矯味劑得到脂肪酸；以索氏提取器提取海帶原料中所含的脂肪酸,摸索提取條件,并以GC-MS技術分析提取物成分,結果獲得了有價值的脂肪酸資料,這為海帶的深加工和利用提供了科學依據；文獻“兩種溶劑提取法提取三角褐指藻中不飽和脂肪酸的比較《食品工業科技》,2006(12):114-116”采用氯仿-甲醇提取法和乙醚-石油醚提取法分別提取三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)中的不飽和脂肪酸,并通過氣相色譜技術分析不飽和脂肪酸的種類及其含量。但這些方法得到的不飽和脂肪酸含量低，尤其是n-3不飽和脂肪酸的含量較低。文獻“從小球藻中提取和富集多不飽和脂肪酸的研究，《大連海洋大學學報》,2010,25(3):275-280”研究了從海水小球藻(Chlorella spp.)中提取和富集多不飽和脂肪酸(PUFA)的方法,就提取劑體系、用量、提取次數等對小球藻粗脂肪提取率的影響以及尿素包合法中尿素、甲醇與脂肪酸甲酯的質量比對PUFA、EPA富集效果的影響進行了研究。但該研究僅針對于小球藻中多不飽和脂肪酸的提取，缺乏普遍應用性。