[發明專利]一種從煙草突變體中篩選高分泌型材料的方法

在審

• 申請號: 201811374489.3
• 申請日: 2018-11-19
• 公開（公告）號: CN109220786A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 李雪君;崔紅;楊永鋒;王召軍;孫計平;孫煥;平文麗;楊欣玲;婁亞楠;李芳芳;李耀宇;丁燕芳
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院煙草研究所
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04;A01H1/06
• 代理公司: 鄭州博派知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 41137
• 代理人: 方燕玉

1.一種從煙草突變體庫中篩選高分泌型材料的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、種子處理：應用物理或化學的方法，對已知特性的煙草種子進行處理，達到誘變的目的；

步驟2、突變群體的初步篩選：將處理過的種子點播在裝有合適基質的育苗盤上，單粒點播，在適宜溫度下，進行漂浮育苗；待長到5-7片葉時，對幼苗的葉片進行腺毛形態學觀察；篩選出與野生型相比腺頭大及腺毛密度明顯增加的材料，同時對剪取的單株進行標記，或直接移植到一個新的漂盤上，此過程可以淘汰90%以上的幼苗；

步驟3、單株篩選鑒定：對苗期篩選出的目標材料在大田進行單株種植，同時種植野生型對照；煙葉成熟期時，對葉面腺毛進行染色觀察，重復鑒定可分泌型腺毛的密度，并對中部葉按照標準方法提取葉面分泌物，進行相關成分的檢測，根據檢測結果，保留葉面分泌物含量較高的材料，單株編號，套袋留種；

步驟4、重復鑒定：將F2代種子種植，大田生長期淘汰重病株和弱小煙株，選擇健壯的株系，在煙葉成熟期時，進行葉面分泌物提取鑒定；并對其形態特征、農藝性狀、抗病性等進行自然選擇，單株系套袋留種，盡可能得到更多變異類型的植株；

步驟5、品系鑒定：對F2代得到的材料進行品系比較試驗，對選出的穩定品系進行生產可用性比較評價，確定目標高分泌型材料。

2.根據權利要求1所述的從煙草突變體庫中篩選高分泌型材料的方法，其特征在于，步驟1中用甲基磺酸乙酯（EMS）、硫酸二乙酯（DES）、快中子中任一種對煙草種子進行處理。

3.根據權利要求1所述的從煙草突變體庫中篩選高分泌型材料的方法，其特征在于，步驟2中對幼苗的煙草葉片進行腺毛形態學觀察具體為：待其長至5-7片葉時，在苗盤上選擇同一大小的葉片，在同一部位剪取0.5cm左右寬窄的葉片，保持鮮活，不能失水，直接放在超景深體視顯微鏡下進行觀察。