[發明專利]一種檢測葛根中生物胺的方法

在審

• 申請號: 201811372977.0
• 申請日: 2018-11-19
• 公開（公告）號: CN109541058A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 吳玉杰;蔡翔宇;江思華
• 申請（專利權）人: 廣西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/04;G01N30/06
• 代理公司: 東營雙橋專利代理有限責任公司 37107
• 代理人: 劉東亮

首次建立了一種超高效液相色譜方法，用于快速提取和測定藥食同源產品葛根中的9種藥用生物胺。9種生物胺包括色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、章魚胺、酪胺、亞精胺、精胺。葛根樣品打碎后用0.4 mol/L鹽酸提取，丹磺酰氯柱前衍生化,加入氨水終止反應,乙腈定容。采用UPLC色譜柱,以乙酸銨和乙腈作為流動相進行梯度洗脫,采用二極管陣列檢測器在波長254nm下檢測，檢測方法呈現良好的線性關系。樣品加標回收率75.6～97.2%,相對標準偏差0.12～5.32%；9種生物胺的方法定量限均為10mg/kg。該方法簡便、快速、靈敏，可用于葛根等動植物性食品中9種生物胺殘留量的同時測定。

技術領域

本發明涉及一種檢測葛根中生物胺的方法，屬于檢測技術領域。

背景技術

生物胺(BAS)是一類具有生物活性和氮的低分子堿性化合物。它們主要由相應的氨基酸在微生物脫羧下形成，或由醛和酮在氨基酸轉氨酶的作用下產生^[1]。常見的生物胺包括色胺、腐胺、酪胺、組胺、精胺、亞精胺、苯乙胺、章胺、尸胺等^[2]。一般情況生物胺是有毒的，當人體在一定程度上積聚時，會對人體造成中毒。它們可引起頭痛、惡心、嘔吐、腹瀉、心悸、血壓變化、呼吸紊亂和其他過敏反應，嚴重時可能危及生命^[3]。在生物胺中，組胺毒性最大，腐胺、尸胺、精胺和亞精胺可以與亞硝酸鹽反應生成亞硝胺，一種強致癌物質^[4]。生物胺廣泛存在于富含蛋白質和氨基酸的食物中，如肉類和肉制品、罐頭食品、海鮮、奶酪、啤酒、葡萄酒植物和農產品^[5-6]。近來發現中草藥中也可能有生物胺的存在^[1]。目前，一些國家已對食品中生物胺含量的限制提出了規定。例如，在歐盟^[6]中，組胺限量為100mg/kg，而在美國^[7]，水產品中組胺限量為50mg/kg；而在中國，高組胺魚類組胺限量為40mg/100g，其他魚類組胺限量為20mg/100g^[8-9]。國內外植物產品中生物胺均未見限量規定，但本研究中發現葛根的根莖含有生物胺。生物胺具有較高的活性，有助于葛根的功效。

然而，微量生物胺是人體內的正常活性成分，在生物細胞中具有重要的生理功能^[11]。建立葛根中生物胺的鑒別和同步測定方法，無論是從食品安全的角度還是從成分活性的角度，都是十分必要的。

生物胺的檢測方法有GC-MS/MS^[12]、離子色譜^[13-14]、HPLC^[15-17]、TLC^[18]和HPLC-MS/MS方法^[1][18]，但前處理步驟比較復雜，操作困難，檢測難度較大。同時，九種生物胺的測定超過30min。現有國家標準^[19]是針對食品中生物胺的測定的，但前處理方法十分復雜。樣品預處理相對繁瑣，包括正己烷脫脂、液-液萃取、pH調節、吹氮等步驟，需要大量的有機溶劑，這對實驗人員的健康有害。

[1]Wu YH,Zhou S,Xu GM.Determination of eight biogenic amines inanimal-derived foodstuffs by high performance liquid chromatography-tandemmass spectrometry without derivatization.Chinese Journal of Chromatography,2013.31(2):111-116.

[2]Silla Santos MH.Biogenic amines:their importance infoods.International Journal of Food Microbiology,1996,29(2/3):213-231.