[發明專利]一種人乳中的功能組分及其制備和應用

在審

• 申請號: 201811366120.8
• 申請日: 2018-11-16
• 公開（公告）號: CN111196827A
• 公開（公告）日: 2020-05-26
• 發明（設計）人: 梁鑫淼;閆競宇;郭志謀;吉素志;張雯婷;屠文娟;李佳齊;金高娃
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C07H3/06
• 分類號: C07H3/06;C07H1/00;A61P1/00
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

本發明涉及一種人乳中的功能組分及其制備方法。該組分的主要成分有3’?SL、6’?SL、LST?a、LST?b、LST?c、DSLNT等，這些成分的結構中含有一個或兩個以上的唾液酸分子，該組分對早產兒的壞死性小腸結腸炎有很好的預防和修復作用。該組分的制備方法是采用人乳樣品經過低溫離心脫脂，膜分離除蛋白后，獲得乳清液，再經柱色譜方法進行分離，以兩性離子、氨基、酰胺基等修飾的硅膠或聚合物的親水性材料為色譜柱固定相，水和有機溶劑或緩沖鹽水溶液和有機溶劑為流動相，使用等度或梯度方法進行洗脫，最終得到所需的酸性寡糖組分。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及一種人乳中的功能組分對早產兒壞死性小腸結腸炎的修復作用及該組分的制備方法。

背景技術

人乳中游離的寡糖(低聚糖)是一類重要的成分，其含量在人乳干物質中排第三位，僅次于乳糖和脂肪。人乳寡糖由五種單糖組合而成，包括葡萄糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、巖藻糖、唾液酸。按照寡糖結構中是否含有唾液酸將其分為酸性寡糖與中性寡糖。人乳中酸性寡糖的種類數量約占總人乳寡糖的30％，含量約占總人乳寡糖15％，可以作為病原體和外源性毒素的特異性識別位點，從而抑制其向腸道上皮細胞的轉移感染。唾液酸殘基同時具有負電荷和親水特性，可以協助調節細胞間的識別作用,例如唾液酸可以作為凝集素配體參與免疫反應調控，唾液酸在促進神經元的萌芽和可塑性方面也具有重要作用,是嬰兒神經發育所必需的重要營養來源，不含唾液酸的中性人乳寡糖則無此作用。經實驗證實酸性寡糖對早產兒的壞死性小腸結腸炎有很好的保護和修復作用。

早產兒的壞死性小腸結腸炎是一種獲得性疾病，是多種原因引起的腸黏膜損害，使之缺血、缺氧，導致小腸、結腸發生彌漫性或局部壞死的一種疾病。主要在早產兒或患病的新生兒中發生，以腹脹，便血為主要癥狀，其特征為腸黏膜甚至為腸深層的壞死，最常發生在回腸遠端和結腸近端，小腸很少受累。腹部X線平片部分腸壁囊樣積氣為特點，本癥是新生兒消化系統極為嚴重的疾病。

目前，對人乳寡糖分離純化主要有3種策略：(1)直接根據分子量的大小或所帶電荷的多少，采用凝膠滲透色譜或高效陰離子交換色譜進行分離[Egge H.et al.,J.Chromatogr.B,1996,685,211-221；Sawatzki G.et al.,Anal.Chem.,1999,71(17),3755-3762]；(2)對天然母乳寡糖進行衍生化修飾后，再利用反相或正相色譜進行分離[LebrillaCB.et al.,Anal.chem.,2012,430,97-104]；(3)通過化學方法、酶促方法、化學-酶促方法，合成母乳寡糖[WongCH.et al.,J Am Chem Soc 1999,121,734-753；Boom RM.etal.,Biotechnol Prog，2003,19,1391]。由于母乳寡糖異構體較多，策略1的選擇性較低，時間周期長，制備效率低。策略2雖然具有一定的選擇性，但得到的寡糖為衍生物形式，破壞了天然母乳寡糖的原始結構。策略3，化學方法面臨糖基供體存在電子、空間的阻礙，使其較難形成糖苷鍵，同時在反應過程中還存在立體化學消旋產生的副產物等缺點。酶促反應中，糖基轉移酶以及糖苷酶的來源以及活性底物受到一定的限制。

發明內容

本發明涉及一種對早產兒的壞死性小腸結腸炎有保護和修復作用的的物質，即人乳中的功能組分酸性寡糖及其制備方法。

酸性寡糖的特征在于含有一個或兩個以上的唾液酸，由D-葡萄糖(Glc)、D-半乳糖(Gal)、N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和N-乙酰神經氨酸(唾液酸,Neu5Ac)，L-巖藻糖(Fuc)這些單糖通過不同的組合和連接方式構成。