[發明專利]一種檢測人運動神經元存活基因拷貝數的相對定量試劑盒

在審

• 申請號: 201811365890.0
• 申請日: 2018-11-16
• 公開（公告）號: CN109554459A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 許舒婷;鄭毓仁;葉曜榮
• 申請（專利權）人: 德必碁生物科技(廈門)有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6851
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊;饒文君

1.一種用于檢測人運動神經元存活基因拷貝數的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含: 用于在檢測樣本內測量SMN1基因第7外顯子、SMN1基因第8外顯子、SMN2基因第7外顯子、SMN2基因第8外顯子及SMN基因第6外顯子的表達水平的試劑。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑包含:

第一反應液，包含：

SMN1基因第7外顯子特異性上游引物Ex7-1F，序列如SEQ ID No.4所示；SMN基因第7外顯子公用下游引物Ex7-R與探針Ex7-D，序列如SEQ ID No.5-6所示；SMN2基因第7外顯子封閉引物Ex7-2B，序列如SEQ ID No.7所示； SMN1基因第8外顯子特異性上游引物Ex8-1F，序列如SEQ ID No.8所示；SMN基因第8外顯子公用下游引物Ex8-R與探針Ex8-D，序列如SEQ IDNo.9-10所示；SMN2基因第8外顯子封閉引物Ex8-2B，序列如SEQ ID No.11所示；內參照CFTR上游引物P1、下游引物P2及探針P3，序列如SEQ ID No.1-3所示；及

第二反應液，包含：

SMN2基因第7外顯子特異性上游引物Ex7-2F，序列如SEQ ID No.12所示；SMN基因第7外顯子公用下游引物Ex7-R與探針Ex7-D，序列如SEQ ID No.5-6所示；SMN1基因第7外顯子封閉引物Ex7-1B，序列如SEQ ID No.13所示；SMN2基因第8外顯子特異性上游Ex8-2F引物，序列如SEQ ID No.14所示；SMN基因第8外顯子公用下游引物Ex8-R與探針Ex8-D，序列如SEQID No.9-10所示；SMN1基因第8外顯子封閉引物Ex8-1B，序列如SEQ ID No.15所示；內參照CFTR上游引物P1、下游引物P2及探針P3，序列如SEQ ID No.1-3所示；及

第三反應液，包含：

SMN基因第6外顯子保留區域之上游引物Ex6-F，序列如SEQ ID No.16所示；下游引物Ex6-R及探針Ex6-D，序列如SEQ ID No.17-18所示；內參照CFTR上游引物P1、下游引物P2及探針P3，序列如SEQ ID No.1-3所示。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：第一反應液包含以下：50~100mM KCl、10~20mM Tris-HCl、1.0~2.0mM MgCl₂、100~300nmol/L dATP、100~300nmol/L dCTP、100~300nmol/L dGTP、300~600nmol/L dUTP，SMN1基因第7外顯子特異性上游引物Ex7-1F100~300nmol/L，第7外顯子公用下游引物Ex7-R100~300nmol/L，第7外顯子公用探針Ex7-D150~250nM，SMN2基因第7外顯子封閉引物Ex7-2B200~400nmol/L，SMN1基因第8外顯子特異性上游引物Ex8-1F為500~700nmol/L，第8外顯子公用下游引物Ex8-R500~700nmol/L，第8外顯子公用探針Ex8-D 200~300nM，SMN2基因第8外顯子封閉引物Ex8-2B 300~600nmol/L，內參照CFTR上游引物P1100~300nmol/L，內參照CFTR下游引物P2100~300nmol/L，內參照CFTR探針P3 100~200nM。