[發明專利]一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝

在審

• 申請號: 201811359922.6
• 申請日: 2018-11-15
• 公開（公告）號: CN109321624A
• 公開（公告）日: 2019-02-12
• 發明（設計）人: 陳政;陳旭;羅紅平;石小培;高繼康;趙志宏
• 申請（專利權）人: 安徽嘉潤生物科技有限責任公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/78
• 代理公司: 北京和信華成知識產權代理事務所(普通合伙) 11390
• 代理人: 胡劍輝

1.一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：包括原料配比—投料—反應條件控制—復合酶制劑添加—反應等待工藝步驟，具體步驟如下：

(1)原料配比：根據需進行酶解的豬皮量，配制所需進行酶解反應的水的比例，豬皮和水的比例為1:1或者1:2，選取豬皮與水的比例為1:1作為優先原料配比；

(2)投料：將酶解反應釜的投料口打開，將比例為1:1的豬皮和水投入到酶解反應釜當中，酶解反應釜接通電源，通過電路控制酶解反應釜內部的攪拌槳轉動，攪拌使豬皮和水在酶解反應釜內分布均勻，關閉投料口；

(3)反應條件控制：將鍋爐加熱產生的蒸汽接入反應釜夾層進行加熱控制，加熱溫度控制在50℃—60℃之間，并進行保溫處理，溫度小于50℃時進行加溫，溫度大于60℃時停止加溫；

(4)復合酶制劑添加：根據投入的豬皮量，制備占豬皮質量百分比為0.15％—0.3％的特異性膠原蛋白酶和普通動植物提取的蛋白酶，控制特異性膠原蛋白酶和普通動植物提取的蛋白酶比例為2:1，將所制備的特異性膠原蛋白酶和普通動植物提取的蛋白酶配伍，通過投料口投入，再次進行步驟(2)的攪拌操作，控制pH值在5-7之間；

(5)反應等待：酶解反應釜持續保溫，控制釜內反應時間為4h—6h，反應時長達到4h不超過6h時間段，將酶解反應釜斷電，選擇關閉。

2.根據權利要求1所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：步驟(1)所述的水為純化水，所述的豬皮均經過切條、脫脂和清洗處理。

3.根據權利要求1所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：步驟(2)所述的攪拌槳周邊圓滑，選取搪瓷作為攪拌槳主要材料，攪拌槳轉速范圍為60r/min～120r/min。

4.根據權利要求1所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：步驟(2)所述的酶解反應釜內部設置有夾層，可通蒸汽或冷卻循環水，外釜體設置有保溫層，保溫層填充珍珠棉、巖棉或聚氨酯澆注發泡。

5.根據權利要求1所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：步驟(4)所述特異性膠原蛋白酶的制備流程如下：

S1.產膠原蛋白酶株群：取等樣的土樣、水樣和皮樣，對取樣品進行富集操作，對富集樣品進行初篩，去除不產目標產物的微生物，再對富集樣品進行復篩，挑選出高產菌株，獲得產膠原蛋白酶菌株；

S2.發酵產膠原蛋白酶：對S1復篩獲得的產膠原蛋白酶菌株進行優化處理，再進行培養條件優化，對優化處理的菌株進行菌種鑒定保藏，優化菌株進行發酵，產膠原蛋白酶菌株發酵產生膠原蛋白酶，獲得特異性膠原蛋白酶。

6.根據權利要求5所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：所述S1中初篩和復篩的溫度均控制在35℃，所述S2中優化處理溫度控制在30℃，優化條件包括碳源、氮源的添加，接種量、pH值考察，無機鹽添加和發酵時間考察。

7.根據權利要求1所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：步驟(5)所述的釜內反應時間通過定時器進行控制，釜內真空度為0Pa。

8.根據權利要求5所述的一種新鮮豬皮制備活性膠原蛋白肽的酶解工藝，其特征在于：所述S2中菌種鑒定保藏包括形態特征鑒定和理化特性鑒定，保藏條件溫度控制在恒溫2℃-20℃之間。