[發明專利]一種蛋白酶與蛋白降解菌的復配制劑及其在雪茄中的應用

有效

• 申請號: 201811352803.8
• 申請日: 2018-11-14
• 公開（公告）號: CN109554306B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 張婷婷;馮穎杰;邱建華;張展;楊宗燦;郝輝;楚文娟
• 申請（專利權）人: 河南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/50;A24B3/04;A24B15/20;A24C1/00;C12R1/07
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

本發明屬于雪茄煙制備技術領域，具體涉及一種利用蛋白酶與蛋白降解菌制備的復配制劑及其在雪茄中的應用專利申請事宜。該復配制劑制備過程包括：以短小芽孢桿菌SMXP?03制備蛋白降解菌菌液，制備堿性蛋白酶溶液備用，制備復配制劑等步驟。本申請針對雪茄煙葉的發酵醇化進行設計，通過采用堿性蛋白酶和特定蛋白降解菌株復合制劑來實現對雪茄煙葉中含氮類物質尤其是蛋白質成分的降解。初步檢測及應用效果表明，通過處理后，雪茄煙葉品質得到了較好提升，較好實現了提質降耗的發明目的，同時對于雪茄煙的生產具有較好的促進作用，因此具有較好的實用價值和推廣應用意義。

技術領域

本發明屬于雪茄煙制備技術領域，具體涉及一種利用蛋白酶與蛋白降解菌制備的復配制劑及其在雪茄中的應用專利申請事宜。

背景技術

含氮類物質尤其是蛋白質是煙葉中的主要組分之一，一定含量的蛋白質有利于增加煙草吸食時滿足感和提供豐富的香氣，但過高的蛋白含量又會導致煙葉燃燒過程中產生明顯的燒焦羽毛味，進而使得吸食時有明顯的苦澀感，同時也會提高一些有害物質的釋放。因此，對于煙葉中含氮類物質尤其是蛋白質含量必須進行適當調整和控制，才能較好確保煙葉的吸食品質。

就煙葉品質完善而言，現有技術中，主要技術手段之一是通過煙葉的自然醇化過程，利用煙葉內源微生物的作用來實現蛋白質的降解，但這種處理方式往往需要較長時間（自然醇化周期一般是1~3年），而且蛋白降解效率往往較為有限。因此，為更好調整煙葉中蛋白質含量，往往還需對醇化后煙葉進行進一步降解處理，以使煙葉品質得到進一步改善。

就卷煙類型而言，烤煙是我國的主要卷煙類型，因此，現有蛋白降解、蛋白控制手段主要圍繞烤煙煙葉進行研究和設計。但統計表明，雪茄煙葉中蛋白質含量往往高于普通烤煙煙葉，而且由于煙草成分差異較大，使得現有烤煙煙葉的蛋白降解手段不能直接用于雪茄煙葉，由此也使得雪茄煙葉品質改善較為緩慢，也因此，對于雪茄煙葉的品質調控手段往往無法直接借鑒烤煙煙葉中的處理方式，往往需要重新設計和驗證才能確保相關技術手段的可行性。

現有技術中，針對雪茄煙葉品質進行改良時，主要技術手段仍然是以自然醇化為主，然后部分借鑒于現有烤煙處理方式，即通過利用蛋白酶處理來適當降低雪茄煙葉中蛋白質含量。但是實際試驗及應用效果也表明：在施用蛋白酶初期，雪茄煙葉中蛋白含量降低效果較為明顯，但隨著時間延長及酶活降低，蛋白含量降低效果也迅速下降，因此，使得相關蛋白含量降低效果不夠明顯，無法有效提升雪茄煙葉品質。也因此，極有必要針對雪茄煙葉特性，有針對性開發降低雪茄煙葉蛋白含量的技術手段，從而為雪茄煙品質的持續改善奠定基礎。

發明內容

本申請主要目的在于提供一種利用堿性蛋白酶與特定蛋白降解菌制備的復配制劑，從而為雪茄煙葉中蛋白含量降低奠定一定技術基礎，進而實現對雪茄煙葉的加速醇化目的和達到對雪茄煙葉的提質降耗技術目標。

本申請所采取的技術方案詳述如下。

一種蛋白酶與蛋白降解菌的復配制劑，該復配制劑通過如下步驟制備獲得：

（1）制備蛋白降解菌菌液，具體而言：

以短小芽孢桿菌（Bacillus pumilus）SMXP-03菌株制備OD₆₀₀=0.8~1.2（優選OD₆₀₀=1.0）左右菌液備用；具體制備過程可參考如下：

首先，以滅菌后煙末與氯化鈉混合物作為培養基備用，培養基制備時，具體物料用量為：每100mL水中，加有煙末4~6g（優選5g），氯化鈉0.6~1.0g（優選0.8g）；

所述煙末，為烤煙煙末，為便于后續發酵處理，可將煙末粉碎后過200目篩；

其次，在培養基中接種短小芽孢桿菌（Bacillus pumilus）SMXP-03菌株后，37℃、120 r/min震蕩培養24 h后，離心收集沉淀，將沉淀用無菌水重懸，調整OD₆₀₀=0.8~1.2左右即可，即為蛋白降解菌菌液，備用；