[發(fā)明專利]一種蛋白酶與蛋白降解菌的復(fù)配制劑及其在雪茄中的應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811352803.8 | 申請(qǐng)日： | 2018-11-14 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN109554306B | 公開（公告）日： | 2022-04-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張婷婷;馮穎杰;邱建華;張展;楊宗燦;郝輝;楚文娟 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 河南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N1/20 | 分類號(hào)： | C12N1/20;C12N9/50;A24B3/04;A24B15/20;A24C1/00;C12R1/07 |
| 代理公司： | 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 時(shí)立新 |
| 地址： | 450000 河南*** | 國(guó)省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 蛋白酶 蛋白 降解 配制 及其 雪茄 中的 應(yīng)用 | ||
1.一種蛋白酶與蛋白降解菌的復(fù)配制劑，其特征在于，該復(fù)配制劑通過如下步驟制備獲得：
（1）制備蛋白降解菌菌液，具體而言：
以短小芽孢桿菌（
所述短小芽孢桿菌SMXP-03，現(xiàn)保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCCNO：M 2017291；
（2）制備堿性蛋白酶溶液備用，具體而言：
將堿性蛋白酶溶解，配制成3000~10000U/mL備用；
（3）制備復(fù)配制劑，具體而言：
在具體使用前，將步驟（1）中所制備蛋白降解菌液與步驟（2）中的堿性蛋白酶溶液混合均勻，即可用于降解雪茄煙葉中蛋白質(zhì)；具體混合時(shí)，以體積比計(jì)，復(fù)配制劑中蛋白降解菌液體積比例為50~90%。
2.如權(quán)利要求1所述蛋白酶與蛋白降解菌的復(fù)配制劑，其特征在于，步驟（3）中，以體積比計(jì)，復(fù)配制劑中蛋白降解菌液體積比例為60%、70%或80%。
3.權(quán)利要求1所述蛋白酶與蛋白降解菌的復(fù)配制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）制備蛋白降解菌菌液，具體而言：
以短小芽孢桿菌SMXP-03菌株制備OD600=0.8~1.2菌液備用；
所述短小芽孢桿菌SMXP-03，現(xiàn)保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCCNO：M 2017291；
（2）制備堿性蛋白酶溶液備用，具體而言：
將堿性蛋白酶溶解，配制成3000~10000U/mL備用；
（3）制備復(fù)配制劑，具體而言：
在具體使用前，將步驟（1）中所制備蛋白降解菌液與步驟（2）中的堿性蛋白酶溶液混合均勻，即可用于降解雪茄煙葉中蛋白質(zhì)；具體混合時(shí)，以體積比計(jì)，復(fù)配制劑中蛋白降解菌液體積比例為50~90%。
4.如權(quán)利要求3所述蛋白酶與蛋白降解菌的復(fù)配制劑的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，具體制備過程如下：
首先，以滅菌后煙末與氯化鈉混合物作為培養(yǎng)基備用，培養(yǎng)基制備時(shí)，具體物料用量為：每100mL水中，加有煙末4~6g，氯化鈉0.6~1.0g；
其次，在培養(yǎng)基中接種短小芽孢桿菌SMXP-03菌株后，震蕩培養(yǎng)，離心收集沉淀，將沉淀用無菌水重懸，調(diào)整OD600=0.8~1.2即為蛋白降解菌菌液。
5.如權(quán)利要求4所述蛋白酶與蛋白降解菌的復(fù)配制劑的制備方法，其特征在于，所述煙末，為烤煙煙末；每100mL水中，加有煙末5g，氯化鈉0.8g。
6.權(quán)利要求1或2所述蛋白酶與蛋白降解菌復(fù)配制劑在雪茄煙葉中的應(yīng)用，其特征在于，用于降解雪茄煙葉中蛋白質(zhì)。
7.如權(quán)利要求6所述蛋白酶與蛋白降解菌復(fù)配制劑在雪茄煙葉中的應(yīng)用，其特征在于，所述雪茄煙葉為茄芯上部二級(jí)海南雪茄煙。
8.利用權(quán)利要求1或2所述復(fù)配制劑的降低雪茄煙葉中蛋白含量的降解方法，期特征在于，包括如下步驟：
（1）制備復(fù)配制劑備用；
（2）雪茄煙葉預(yù)處理
將雪茄煙葉進(jìn)行回潮處理，調(diào)整其含水率為15~20%；
（3）發(fā)酵處理
按步驟（2）中雪茄煙葉1~3%質(zhì)量比例，將步驟（1）中所制備復(fù)配制劑均勻噴灑到步驟（2）的雪茄煙葉表面；
然后將煙葉堆積擺放，控制堆溫30~40℃、環(huán)境濕度65~80%，堆積發(fā)酵8~12d；發(fā)酵結(jié)束后，調(diào)整雪茄煙葉含水率為15±1%即可。
9.如權(quán)利要求8所述降低雪茄煙葉中蛋白含量的降解方法，期特征在于，步驟（3）中，按雪茄煙葉2%質(zhì)量比例，噴施復(fù)配制劑。
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