[發明專利]一種識別AFP抗原短肽的T細胞受體及其編碼序列

在審

• 申請號: 201811348714.6
• 申請日: 2018-11-13
• 公開（公告）號: CN111171137A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 李懿;張亞靜
• 申請（專利權）人: 中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/12;C12N15/867;C12N5/10;A61K38/17;A61K35/17;A61P35/00;A61P37/02
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 胡丹;徐迅

本發明提供了一種能夠特異性結合衍生自AFP抗原的短肽FMNKFIYEI的T細胞受體(TCR)，所述抗原短肽FMNKFIYEI可與HLA A0201形成復合物并一起被呈遞到細胞表面。本發明還提供了編碼所述TCR的核酸分子以及包含所述核酸分子的載體。另外，本發明還提供了轉導本發明TCR的細胞。

技術領域

本發明涉及能夠識別源自AFP抗原短肽的TCR及其編碼序列，本發明還涉及轉導上述TCR來獲得的AFP特異性的T細胞，及他們在預防和治療AFP相關疾病中的用途。

背景技術

AFP(αFetoprotein)也稱α胎蛋白，是胚胎發育過程中表達的一種蛋白，是胚胎血清的主要成分。在發育過程中，AFP在卵黃囊及肝臟中有比較高的表達水平，隨后被抑制。在肝細胞癌中，AFP的表達被激活(Butterfield et al.J Immunol.,2001,Apr 15；166(8):5300-8)。AFP在細胞內生成后被降解成小分子多肽，并與MHC(主組織相容性復合體)分子結合形成復合物，被呈遞到細胞表面。FMNKFIYEI(SEQ ID NO:9)是衍生自AFP抗原的短肽，是AFP相關疾病治療的一種靶標。

T細胞過繼免疫治療是將對靶細胞抗原具有特異性的反應性T細胞轉入病人體內，使其針對靶細胞發揮作用。T細胞受體(TCR)是T細胞表面的一種膜蛋白，其能夠識別相應的靶細胞表面的抗原短肽。在免疫系統中，通過抗原短肽特異性的TCR與短肽-主組織相容性復合體(pMHC復合物)的結合引發T細胞與抗原呈遞細胞(APC)直接的物理接觸，然后T細胞及APC兩者的其他細胞膜表面分子就發生相互作用，引起一系列后續的細胞信號傳遞和其他生理反應，從而使得不同抗原特異性的T細胞對其靶細胞發揮免疫效應。因此，本領域技術人員致力于分離出對AFP抗原短肽具有特異性的TCR，以及將該TCR轉導T細胞來獲得對AFP抗原短肽具有特異性的T細胞，從而使他們在細胞免疫治療中發揮作用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種識別AFP抗原短肽的T細胞受體。

本發明的第一方面，提供了一種T細胞受體(TCR)，所述TCR能夠與FMNKFIYEI-HLAA0201復合物結合。

在另一優選例中，所述TCR包含TCRα鏈可變域和TCRβ鏈可變域，所述TCRα鏈可變域的CDR3的氨基酸序列為CAVLDNYGQNFVF(SEQ ID NO:12)；和/或所述TCRβ鏈可變域的CDR3的氨基酸序列為CASSLGPYEQYF(SEQ ID NO:15)。

在另一優選例中，所述TCRα鏈可變域的3個互補決定區(CDR)為：

αCDR1-YGATPY(SEQ ID NO:10)

αCDR2-YFSGDTLV(SEQ ID NO:11)

αCDR3-CAVLDNYGQNFVF(SEQ ID NO:12)；和/或

所述TCRβ鏈可變域的3個互補決定區為：

βCDR1-SGHAT(SEQ ID NO:13)

βCDR2-FQNNGV(SEQ ID NO:14)

βCDR3-CASSLGPYEQYF(SEQ ID NO:15)。

在另一優選例中，所述TCR包含TCRα鏈可變域和TCRβ鏈可變域，所述TCRα鏈可變域為與SEQ ID NO:1具有至少90％序列相同性的氨基酸序列；和/或所述TCRβ鏈可變域為與SEQ ID NO：5具有至少90％序列相同性的氨基酸序列。

在另一優選例中，所述TCR包含α鏈可變域氨基酸序列SEQ ID NO:1。

在另一優選例中，所述TCR包含β鏈可變域氨基酸序列SEQ ID NO:5。