[發(fā)明專利]一種煙草氯離子吸收基因NtSLAC2及其克隆方法與應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811348443.4 | 申請日： | 2018-11-13 |
| 公開（公告）號： | CN109439668B | 公開（公告）日： | 2021-12-24 |
| 發(fā)明（設計）人： | 白戈;謝賀;逄濤;楊大海;李勇;姚恒;童治軍;張誼寒;肖炳光;李永平 | 申請（專利權(quán)）人： | 云南省煙草農(nóng)業(yè)科學研究院 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 昆明知道專利事務所(特殊普通合伙企業(yè)) 53116 | 代理人： | 姜開俠;謝喬良 |
| 地址： | 650021*** | 國省代碼： | 云南;53 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 煙草 氯離子 吸收 基因 ntslac2 及其 克隆 方法 應用 | ||
1.一種煙草氯離子吸收基因NtSLAC2的應用，其特征在于，所述煙草氯離子吸收基因NtSLAC2的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示，其編碼的氨基酸序列如SEQ ID No:2所示；在煙草植株體內(nèi)通過農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化RNAi干擾載體方法抑制
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于，煙草氯離子吸收基因NtSLAC2的克隆方法包括以下步驟：
A、煙草葉片cDNA合成：提取煙草RNA，反轉(zhuǎn)錄得到第一鏈cDNA；
B、NtSLAC2基因的PCR擴增：以反轉(zhuǎn)錄得到的第一鏈cDNA作為模板，根據(jù)NtSLAC2基因序列設計合成特異性引物，進行PCR擴增，回收和純化PCR擴增產(chǎn)物，并測序。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于，特異性引物為：
正向引物：5’- ATGAGAATCACTCCTGCATTAGATG -3’；
反向引物：5’- TCAAATAATTCGAGAAGACTGTTTG -3’。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于，PCR擴增的反應體系和反應條件如下：
。
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