[發明專利]一種重金屬和肌酐聯合檢測試紙條及其制備方法與應用

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• 申請號: 201811348070.0
• 申請日: 2018-11-13
• 公開（公告）號: CN109298188A
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 唐小江
• 申請（專利權）人: 廣東眾爾健生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/70
• 分類號: G01N33/70;G01N33/558;G01N33/533
• 代理公司: 廣州市科豐知識產權代理事務所(普通合伙) 44467
• 代理人: 王海曼

本發明公開了一種重金屬和肌酐聯合檢測試紙條及其制備方法與應用；旨在提供一種可同時檢測重金屬離子和肌酐的快速、準確、簡便、廉價的檢測試紙條；其技術要點包括由底板依次銜接有樣品墊、結合墊、層析膜、肌酐試紙和吸水墊，所述的層析膜上設有C線和T線，在結合墊上噴有同一種膠體金顆粒標記的重金屬離子抗體；在層析膜上T位置包被熒光微球標記的重金屬離子抗原，C線位置包被的是熒光微球標記的BSA；熒光免疫層析檢測和干化學分析領域。

技術領域

本發明涉及熒光免疫層析檢測和干化學分析領域，具體是涉及一種重金屬和肌酐聯合檢測試紙條。

背景技術

重金屬原義是指比重大于5的金屬，如汞、金、銀、銅、鐵、鋅、鉛等。雖然有些重金屬是個體需要的微量元素，但大部分重金屬并非身體所需，而且所有重金屬在體內累積達到一定程度，都會造成慢性中毒。有些重金屬進入體內會破壞人體正常生理功能，被稱為有毒重金屬，如鉻(Cr)、鎘(Cd)、汞(Hg)、鉛(Pb)、砷(As)等。

重金屬污染指由重金屬及其化合物造成的環境污染。重金屬污染包括：化工污染、汽車尾氣排放、垃圾焚燒等。其中汞、鉛和砷等影響中樞神經系統，銅、鎘、鉛和汞會影響腎臟和肝臟，鎳、銅、鎘和鉻會影響皮膚、骨骼和牙齒。重金屬中毒輕則發生怪病(水俁病、痛痛病等)，重者就會死亡。我國重金屬污染非常嚴重，按照環保部和國土資源部于2014年4月17日發布的《中國土壤污染狀況調查報告》，全國土壤約13％重金屬超標，重金屬污染范圍廣，曝露人群多，嚴重危害人民健康，但現有臨床檢測重金屬的方法需要大型儀器、操作復雜、費用高、時間長，亟需高通量的快速檢測技術(POCT)。

我國土壤重金屬污染又以鎘污染最為嚴重，鎘超標達7％。鎘能在體內長期蓄積，可造成急、慢性中毒，對人體的免疫系統、肝臟、腎臟等有很大的損傷，甚至會引起流產、畸形、癌癥等。鎘是確定致癌物及列為第六位危害人體健康的有毒物質，我國湖南、廣西、廣東等已發現大批鎘污染中毒人群，但因為缺少快速簡便廉價的檢測技術等原因，至今未進行人群普查。

尿鎘是慢性鎘中毒最重要的診斷指標之一。由于尿鎘含量與排尿量有關，臨床診斷采用尿肌酐作為矯正參數。因為肌酐是人體肌肉中磷酸肌酸的代謝終產物，可隨尿液排出。正常人尿中肌酐的日排出量相當穩定，正常范圍為10mg/dL到300mg/dL，基本不受食物蛋白含量和尿量的影響，因此常被用作尿中其他排泄物濃度的校正參數。用尿肌酐做校正，可以消除取樣方式和尿量對尿鎘排泄量的影響，避免了單獨觀察尿鎘水平產生的片面性。尿鎘正常值大多數在1μg/g肌酐(或1μg/L)以下，上限為5μg/g肌酐(或5μg/L)。根據國家標準GBZ 17-2015《職業性鎘中毒的診斷》，尿鎘連續2次高于5μmol/mol肌酐(即5μg/g肌酐)是診斷慢性鎘中毒必要指標。

鎘的檢測方法很多，如：原子吸收法、分光光度法、原子熒光光譜法、電感耦合等離子體質譜法、高效液相色譜法等，它們大多需要昂貴的儀器、復雜的操作和較長的檢測時間，并需要專門的技術人員來完成。

肌酐的檢測方法也較多，如：堿性苦味酸法、酶法、毛細管電泳法、液相層析法等，它們也大多需要相關儀器設備，操作復雜、檢測速度慢、檢測成本昂貴、臨床使用不便，而且無法與鎘同時檢測進行校正。

因此，現有尿鎘檢測技術難以滿足體外快速檢測的需求，有必要發明一種可以同時檢測Cd²⁺和肌酐的快速診斷試紙，提供快速、準確、簡便、廉價的實用推廣技術。

現有滿足以上要求的鎘檢測方法有側向層析試紙條，肌酐檢測方法有干化學試紙，前者為熒光免疫層析技術，后者為干化學分析技術，但是熒光免疫層析技術中的膠體金顏色可能會影響干化學試紙的結果觀察，干化學試紙的有色物質可能會影響熒光免疫層析技術的反應，因此還需研究能同時檢測尿鎘和肌酐的方法。

發明內容

本發明的第一個目的是提供一種高靈敏度、操作簡單、快速、低成，并可同時檢測重金屬離子和肌酐，相互間無干擾的檢測試紙條。