[發(fā)明專(zhuān)利]一種制備布瓦西坦中間體的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811347071.3
• 申請(qǐng)日: 2018-11-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109852644B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫傳民
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 弈柯萊生物科技（上海）股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P17/04
• 分類(lèi)號(hào): C12P17/04;C07D307/33
• 代理公司: 上海助之鑫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31328
• 代理人: 陳詳

1.一種醇脫氫酶在制備(R)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮中的應(yīng)用，其中，所述醇脫氫酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示；

所述醇脫氫酶催化作為底物的化合物2反應(yīng)得到化合物1，化合物1即為(R)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮，其反應(yīng)式如下：

并且，所述應(yīng)用中所述醇脫氫酶催化的反應(yīng)體系包括：作為底物的化合物2、所述醇脫氫酶和輔酶，所述輔酶為NADH或NADPH。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述反應(yīng)體系還包括葡萄糖脫氫酶和葡萄糖，反應(yīng)過(guò)程中在葡萄糖脫氫酶以及葡萄糖的存在下實(shí)現(xiàn)所述輔酶的再生。

3.一種制備(R)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮的方法，其特征在于，包括步驟：

(1)配制反應(yīng)體系并進(jìn)行酶催化反應(yīng)

所述反應(yīng)體系中包括：作為底物的化合物2、醇脫氫酶和輔酶；以化合物2為底物，在醇脫氫酶作用下，得到化合物1，化合物1即為(R)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮；

其反應(yīng)式如下：

其中，所述醇脫氫酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，所述輔酶為NADH或NADPH。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述反應(yīng)體系還包括葡萄糖脫氫酶和葡萄糖，反應(yīng)過(guò)程中在葡萄糖脫氫酶以及葡萄糖的存在下實(shí)現(xiàn)所述輔酶的再生。

5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述化合物2和輔酶的質(zhì)量比為1000～10000:1。

6.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述化合物2和葡萄糖的摩爾比為1:1-1:5。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述化合物2和葡萄糖的摩爾比為1:1-1:3。

8.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述反應(yīng)體系的pH為8.0-10.0。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述反應(yīng)體系的pH為8.5-9.5。

10.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，酶催化反應(yīng)的溫度為30-40℃。

11.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法還包括步驟(2)，純化所述化合物1。

12.一種制備布瓦西坦的方法，其特征在于，其包括下述步驟：

(1)按照權(quán)利要求3至權(quán)利要求11任一所述的方法，制得(R)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮；

(2)將步驟(1)制得的(R)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮作為中間體進(jìn)行反應(yīng)，得到布瓦西坦。