[發明專利]一種透明質酸中鄰苯二甲酸酯塑化劑殘留的檢測方法

在審

• 申請號: 201811346943.4
• 申請日: 2018-11-13
• 公開（公告）號: CN109212104A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 陳雯雯;陳玉娟;李漫;毛華;李德杰;郭學平
• 申請（專利權）人: 華熙福瑞達生物醫藥有限公司;山東華熙海御生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京彩和律師事務所 11688
• 代理人: 劉磊;閆桑田

本發明提供一種透明質酸中鄰苯二甲酸酯塑化劑殘留的檢測方法，其包括：制樣步驟，利用無水乙醇和塑化劑的標準品，經過過濾，制備塑化劑的標準品溶液，利用無水乙醇提取透明質酸中的塑化劑，進行過濾、濃縮，制作供試品溶液，無水乙醇經過濾作為空白溶液；和檢測步驟，使用高效液相色譜檢測所得到的供試品溶液、標準品溶液和空白溶液，使用外標法確定塑化劑的殘留量。本發明的方法簡便易行，不需使用質譜，降低了檢測成本，準確度高，檢測限不高于0.06mg/kg。

技術領域

本發明涉及塑化劑的檢測領域，具體涉及一種檢測透明質酸中的鄰苯二甲酸酯塑化劑殘留的方法。

背景技術

透明質酸(Hyaluronic acid，簡稱HA)又名玻璃酸，是由(1-3)-2-乙酰氨基-2-脫氧-D-葡萄糖(1-4)-D-D-葡萄醛酸雙糖重復單位所組成的高分子量的直鏈粘多糖。1934年由Meyer等人從牛玻璃球眼中首次提取獲得。

透明質酸以其獨特的分子結構和理化性質在機體內顯示出多種重要的生理功能，如潤滑關節，調節血管壁的通透性，調節蛋白質，水電解質擴散及運轉，促進創傷愈合等。尤為重要的是，透明質酸具有特殊的保水作用，是目前發現的自然界中保濕性最好的物質，被稱為理想的天然保濕因子，由于HA具有良好的保濕性、粘彈性、滲透性和延展性，同時無任何免疫原性和毒性，被廣泛應用于化妝品、食品、醫藥和臨床治療等行業領域。

透明質酸作為天然的保濕因子，早已被廣泛應用到化妝品、醫藥等領域。近幾年來，隨著人們健康消費觀念的形成，如何吃出健康與美麗成為人們關注的焦點，透明質酸在食品中的應用也越來越廣泛，比如作為關節營養的膳食補充產品，以及作為補充水分、改善皮膚彈性的日常美容保健食品：透明質酸飲料、口服液、美容膠囊、酸奶、果凍、口香糖、綠茶等。若不能準確檢測出透明質酸生產過程中帶入的塑化劑含量，導致透明質酸塑化劑含量超標、純度降低，長期使用塑化劑超標的透明質酸化妝品，或長期食用塑化劑超標的透明質酸產品，都會對健康造成很大的危害。

在應用透明質酸時為了良好地表現其特性以及對人體的安全性，需要保證其純度和質量。由于透明質酸的生產原料以及生產過程中接觸的容器、管線例如塑料軟管等，不可避免會含有雜質。為了保證透明質酸中的雜質、特別是塑化劑的含量在規定范圍以下，需要有效地檢測塑化劑的方法。

塑化劑(Plasticizer)是一種增加材料的柔軟性或是材料液化的添加劑。其中最常見的塑化劑是鄰苯二甲酸酯類物質(Phthalate Esters,PAEs)，是鄰苯二甲酸的酯化衍生物。鄰苯二甲酸酯塑化劑是具些許芳香氣味或無氣味的無色液體，中等黏度、高穩定性、低揮發性、成本低廉、低水溶解度，但易溶于多數有機溶劑中。鄰苯二甲酸酯類在日常及工業上被廣泛使用，以鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)為最大宗，占塑化劑產量的四分之三，其次是鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)。鄰苯二甲酸酯類塑化劑被歸類為疑似環境荷爾蒙，其生物毒性主要屬雌激素與抗雄激素活性，會造成內分泌失調，阻害生物體生殖機能，包括生殖率降低、流產、天生缺陷、異常的精子數、睪丸損害，還會引發惡性腫瘤、造成畸形兒。

目前，有關PAEs的檢測方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、液質聯用法(HPLC-MS)和氣質聯用法(GC-MS)。例如在專利文獻1 中公開了一種食用油中鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測方法，其中使用的是氣相色譜-質譜聯用檢測。另外，在國家標準GB/T21911-2008“食品中鄰苯二甲酸酯的測定”中，也公開了一種檢測塑化劑殘留的GC-MS法，其中，在試樣處理中，對于不含油脂試樣，是將5.0mL液體試樣，加入正己烷2.0mL 萃取后，取上層清液進行GC-MS分析，另外對于固體或半固體試樣而言，是將5.00g試樣加約50mL水進行檢測。對于含油脂試樣，是將油脂試樣 0.50g，用體積比為乙酸乙酯:環己烷10.0mL溶解處理后進行GC-MS分析。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1:CN 104698109A