[發明專利]一種快速評價葡萄糖氧化酶產酸能力的方法

在審

• 申請號: 201811341430.4
• 申請日: 2018-11-12
• 公開（公告）號: CN109280693A
• 公開（公告）日: 2019-01-29
• 發明（設計）人: 于東;陳寧波;陳鋒亮;荊新堂;劉延杰
• 申請（專利權）人: 濟南百斯杰生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/26
• 分類號: C12Q1/26
• 代理公司: 濟南千慧專利事務所(普通合伙企業) 37232
• 代理人: 吳紹群

本申請公開了一種快速評價葡萄糖氧化酶產酸能力的方法，所述方法包括如下步驟：(1)配置一定濃度的葡萄糖溶液，靜置一段時間后得到pH穩定的葡萄糖溶液，測定pH穩定的葡萄糖溶液的pH，得第一pH值；(2)向步驟(1)pH穩定的葡萄糖溶液中加入一定量的待測葡萄糖氧化酶，反應一段時間后，測定溶液的pH，得第二pH值；(3)比較第一pH值和第二pH值，即可以反映待測葡萄糖氧化酶的產酸能力。本發明具有檢測時間短，方法簡單，快速，重現性好的優點。

技術領域

本發明涉及一種快速評價葡萄糖氧化酶產酸能力的方法。

背景技術

葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，簡稱GOD)能夠在有氧氣的條件下專一性催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸和過氧化氫。葡萄糖酸可以降低動物腸道pH值，再加上氧氣被消耗，可以抑制動物腸道內有害菌生長繁殖、促進有益菌的生長繁殖。葡萄糖氧化酶廣泛地分布于動物、植物和微生物體內，但由于微生物具有生長繁殖速度快，來源廣等特點，使之成為葡萄糖氧化酶的主要來源，微生物中的主要生產菌株為黑曲霉和青霉。葡萄糖氧化酶廣泛應用于食品、飼料、醫藥等行業中，起到了去除葡萄糖、脫氧、殺菌等作用。

葡萄糖氧化酶在飼料領域作為一種新型酶制劑，有著出色的產酸能力，能在底物存在的條件下快速降低溶液的pH，而低pH具有改善動物腸道健康的作用。

當前要解決葡萄糖氧化酶產酸能力的評價問題，迫切需要一種體外評判方法，來真實快速地反映葡萄糖氧化酶在實際生產中的產酸能力。

發明內容

針對現有技術中存在的缺陷，本發明的目的在于提供一種快速評價葡萄糖氧化酶產酸能力的方法，具有檢測時間短，方法簡單，快速，重現性好的優點。

為達到以上目的，本發明采取的技術方案是：

一種快速評價葡萄糖氧化酶產酸能力的方法，所述方法包括如下步驟：

(1)配置一定濃度的葡萄糖溶液，靜置一段時間后得到pH穩定的葡萄糖溶液，測定pH穩定的葡萄糖溶液的pH，得第一pH值；

(2)向步驟(1)pH穩定的葡萄糖溶液中加入一定量的待測葡萄糖氧化酶，反應一段時間后，測定溶液的pH，得第二pH值；

(3)比較第一pH值和第二pH值，即可以反映待測葡萄糖氧化酶的產酸能力。

在上述方法中，所述步驟(1)中葡萄糖溶液的濃度為1％—30％，優選5％—10％，更優選6％；所述步驟(1)中靜置一段時間為0.5—25min。

在上述方法中，所述步驟(2)中加入的待測葡萄糖氧化酶的終濃度為0.1—10U/mL，優選0.3—1U/mL；所述步驟(2)反應一段時間為1—10h，優選，2-8h，更優選2h。

在上述方法中，所述步驟(1)中在配置葡萄糖溶液時加入一定濃度的強酸強堿鹽；

優選的，所述強酸強堿鹽選自KCl、NaCl、K₂SO₄、Na₂SO₄、KNO₃、或NaNO₃，優選KCl或NaCl，更優選KCl。

在上述方法中，當所述強酸強堿鹽為KCl時，所述強酸強堿鹽的終濃度為8.4×10^-4mol/L—2.7×10^-2mol/L(即實施例5表5中10％KCl溶液加入量為0.03125—1mL)，優選6.7×10^-3mol/L—1.3×10^-2mol/L(即實施例5表5中10％KCl溶液加入量為0.25—0.5mL)；