[發明專利]一種載有利福平的復合外泌體及其制備方法有效
| 申請號： | 201811338241.1 | 申請日： | 2018-11-12 |
| 公開（公告）號： | CN109364259B | 公開（公告）日： | 2021-08-31 |
| 發明（設計）人： | 胡春梅;唐秋莎;黃莉莉;張俠 | 申請（專利權）人： | 南京市第二醫院（江蘇省傳染病醫院;南京市公共衛生醫療中心） |
| 主分類號： | A61K47/46 | 分類號： | A61K47/46;A61K31/496;A61P31/04;A61P31/12 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 210000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 載有 利福平 復合 外泌體 及其 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種載有利福平的復合外泌體的制備方法，由如下步驟組成：
1)將利福平、外泌體和電穿孔緩沖液混合，在2～6℃下進行電穿孔處理，得到載有利福平的復合外泌體初體；
2)將所述步驟1)的載有利福平的復合外泌體初體在35～40℃下孵育25～35min，得到載有利福平的復合外泌體；
所述步驟1)中電穿孔處理的條件包括：電壓390～410v，電容140～160μF，放電時間0.9～1.1ms；
所述步驟2)孵育25～35min后還包括將孵育后得到的孵育液依次進行超濾、離心；
所述離心的離心力為4500～5500g，所述離心的時間為25～35min；
所述步驟1)中利福平、外泌體和電穿孔緩沖液的質量體積比為9～11mg:95～105μg:100μL；
所述步驟1)中電穿孔緩沖溶液為海藻糖PBS溶液，所述海藻糖PBS溶液中海藻糖的濃度為50mmol/L；所述海藻糖PBS溶液的pH值為7.2～7.5；
所述載有利福平的復合外泌體中利福平的濃度為2497.5μg/mL。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述超濾用膜的截留分子量為100KDa。
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