[發(fā)明專利]一種無血清成分的高效間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811332303.8
• 申請(qǐng)日: 2018-11-09
• 公開（公告）號(hào): CN109402050A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李劍平;李曉豐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 沈陽中心血站
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775
• 代理公司: 沈陽亞泰專利商標(biāo)代理有限公司 21107
• 代理人: 史力伏

1. 一種無血清成分的高效間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液，其特征在于，培養(yǎng)液包括以下成分：10%人血小板裂解液、0.4%青鏈霉素（Pen Strep）、2mmol/L長(zhǎng)效谷氨酰胺、15ng/ml趨化因子XCL1、25ng/ml趨化因子CCL3、18ng/ml熱休克蛋白(HSP70)、26ng/ml端粒酶抑制劑 IFN-α2b、基礎(chǔ)培養(yǎng)基DMEM。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無血清成分的高效間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液，其特征在于，培養(yǎng)液的pH值為6.8~7.0，滲透壓為310 mOsm/kg。

3.一種無血清成分的高效間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液的制備方法，包括以下步驟：

步驟1、人血小板裂解液的制備：

（1）取2×10¹¹ L^-1的機(jī)采人血小板，加入250ml 離心瓶中，6000g 室溫離心20min；

（2）去上清，加入生理鹽水洗血小板，2000g室溫離心10min后用15ml生理鹽水懸起；

（3）置于-20℃冰箱中冷凍過夜，后置于室溫下融化；

（4）如此進(jìn)行三個(gè)循環(huán)，得血小板裂解液；

步驟2、 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液的制備：

分別取100ml人血小板裂解液、4ml Pen Strep（青鏈霉素）、2mmol 長(zhǎng)效谷氨酰胺、15ng/ml趨化因子XCL1、25ng/ml趨化因子CCL3、18ng/ml熱休克蛋白（HSP70），26ng/ml端粒酶抑制劑IFNα2b混合，然后用基礎(chǔ)培養(yǎng)基DMEM補(bǔ)至1L體積，調(diào)節(jié)pH值為6.8~7.0，滲透壓為310 mOsm/kg，即得本發(fā)明間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液。