[發(fā)明專利]一種線粒體定位導(dǎo)肽及其發(fā)現(xiàn)方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811330295.3
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109575116B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 夏立群;魯義善;汪志文;陳建林
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東海洋大學(xué);廣東海洋大學(xué)深圳研究院
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K19/00;C12N15/12;C12N15/62;C12N15/85;G01N33/68;A61K47/42;A61P35/00;A61P7/00;A61P31/12;A61P33/00;A61P31/04
• 代理公司: 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562
• 代理人: 宋平

1.一種線粒體定位導(dǎo)肽，所述的導(dǎo)肽選自如下序列：

(a)由SEQ ID NO.l所示的氨基酸序列組成的多肽。

2.一種融合蛋白，所述融合蛋白包括如權(quán)利要求1所述的線粒體定位導(dǎo)肽和目標(biāo)蛋白，所述線粒體定位導(dǎo)肽位于所述目標(biāo)蛋白的N端；

所述目標(biāo)蛋白是熒光蛋白。

3.一種重組表達(dá)載體，所述重組表達(dá)載體含有編碼權(quán)利要求1所述的線粒體定位導(dǎo)肽的基因序列或權(quán)利要求2所述的融合蛋白的基因序列；

編碼所述線粒體定位導(dǎo)肽的基因序列選自SEQ ID NO.2。

4.一種宿主細(xì)胞，所述宿主細(xì)胞含有如權(quán)利要求3所述的重組表達(dá)載體。

5.一種權(quán)利要求1所述的線粒體定位導(dǎo)肽、權(quán)利要求2所述的融合蛋白、如權(quán)利要求3所述的重組表達(dá)載體或如權(quán)利要求4所述的宿主細(xì)胞在將目標(biāo)蛋白定位于線粒體中的應(yīng)用。

6.一種將目標(biāo)蛋白定位于線粒體的方法，其特征在于包括以下步驟：

(a)將權(quán)利要求2所述的融合蛋白的基因?qū)氚屑?xì)胞中，從而將所述目標(biāo)蛋白定位于所述靶細(xì)胞的線粒體上；所述融合蛋白的基因自上游至下游依次包括編碼導(dǎo)肽的基因序列和編碼目標(biāo)蛋白的基因序列；或

(b)將如權(quán)利要求2所述的融合蛋白加入靶細(xì)胞生長環(huán)境中，從而使目標(biāo)蛋白跨過靶細(xì)胞的細(xì)胞膜進(jìn)入所述靶細(xì)胞中，并最終定位于靶細(xì)胞的線粒體上；所述融合蛋白自N端至C端依次包括線粒體定位導(dǎo)肽和目標(biāo)蛋白的氨基酸序列；

所述的靶細(xì)胞為真核細(xì)胞。

7.一種權(quán)利要求1所述的線粒體定位導(dǎo)肽或權(quán)利要求2所述的融合蛋白在制備治療遺傳病、惡性腫瘤、血液病，病毒、寄生蟲、細(xì)菌感染的疫苗、藥物或藥物組合物中的應(yīng)用。