[發明專利]大蒜莖尖培育的良種繁育方法

在審

• 申請號: 201811328890.3
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109220807A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 王海平;李錫香;武亞紅;宋江萍;張曉輝;邱楊;沈鏑
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蔬菜花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安知誠思邁知識產權代理事務所(普通合伙) 61237
• 代理人: 麥春明

1.大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，具體步驟如下：

步驟一、選取材料：選取當年收獲的10月至第二年6月的飽滿無病傷大蒜鱗芽，將大蒜鱗芽去除外葉，置于干凈的器皿內，用沙布封口；

步驟二、接種環境滅菌消毒：對超凈工作臺、手和攝子殺菌消毒；

步驟三、大蒜鱗芽脫毒：在超凈工作臺無菌環境，先用70％酒精浸沒大蒜鱗芽，振蕩30～60sec，然后用無菌水沖洗1～2次，再用10％次氯酸鈉溶液振蕩滅菌10min，最后用無菌水洗滌5～7次；

步驟四、剝取大蒜莖尖進行接種：在無菌培養皿內，將大蒜鱗芽置于8～40倍解剖鏡下，用消毒后解剖針將大蒜鱗芽的葉片和葉原基剝掉，將剝離好的莖尖接種在接種培養基內培養18～22天，生成組培苗；

步驟五、植株分化和再生：將無毒的組培苗轉移在莖尖分化培養基內，20天分化為分化苗，再將分化苗繼續擴繁3代或者轉移至生根培養基內，30～40天分化成再生植株；

步驟六、獲得原原種：對再生植株進行微型蒜誘導或者田間移栽，獲得原原種；

步驟七、移栽原原種，繁育良種大蒜。

2.根據權利要求1所述的大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，所述步驟四的接種培養基為B5+6-BA0.1mg/l+NAA 0.1mg/l+3％蔗糖培養基。

3.根據權利要求1所述的大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，所述步驟五的莖尖分化培養基為B5+6-BA 1.0mg/l+NAA 0.1mg/l+PP333 3.0ppm+3％蔗糖培養基。

4.根據權利要求1所述的大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，所述步驟五的生根培養基為MS+6-BA 1.0mg/l+NAA 0.1mg/l+PP333 2.0ppm+3％蔗糖培養基。

5.根據權利要求1所述的大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，所述步驟六對再生植株進行微型蒜誘導獲得原原種的具體步驟為：切取2.8～3.2cm帶根再生苗接入微型蒜誘導培養基中，初代培育29～31天，長出白色小鱗莖，68～72天后收獲小鱗莖，獲得原原種。

6.根據權利要求1～5任一項所述的大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，所述步驟四～步驟六的組培苗培育、植株分化和再生以及對再生植株進行微型蒜誘導均是在光照強度為3000lux～5000lux、溫度為18～28℃的無菌培養室進行。

7.根據權利要求1所述的大蒜莖尖培育的良種繁育方法，其特征在于，所述步驟六再生植株田間移栽獲得原原種的具體步驟如下：

步驟6.1、煉苗：從培養室中取出再生植株，即蒜苗，置于10～28℃溫室中，對溫室封口煉苗2～3天后，打開溫室口加入蓋過培養基3～5mm的自來水，再繼續煉苗2～3天后育苗移栽；

步驟6.2、育苗移栽：育苗基質為蛭石，移栽前對蛭石滅菌并用水澆透，在蛭石上挖小穴，用水沖洗蒜苗后放于蛭石穴中并覆蓋；前七天每天澆營養液兩次，并適當補水；

步驟6.3、田間移栽：育苗移栽14天后，將蒜苗移栽于環境溫度為15～28℃的較大花缽或者大田后正常田間管理，在田間移栽后獲得的鱗莖為原原種。