[發明專利]一種富硒蛹蟲草奶粉中蟲草素和腺苷的檢測方法

在審

• 申請號: 201811327176.2
• 申請日: 2018-11-08
• 公開（公告）號: CN109521108A
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 王興磊;焦子偉;李芳;馬麥艷;劉菲菲;粟有志;周均;李艷美
• 申請（專利權）人: 伊犁師范學院;伊犁出入境檢驗檢疫局綜合技術服務中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及蟲草素和腺苷同時檢測方法，具體涉及一種富硒蛹蟲草奶粉中蟲草素和腺苷的檢測方法，取樣品0.50g(精確至0.01g)于50mL具塞離心管中，以一級水為提取溶劑，置渦旋儀以3000r/min渦旋1min后，超聲30min；將超聲后的上述溶液以8000r/min離心，取上清液1mL移至備有0.050gSAX凈化劑容器中，置渦旋儀以3000r/min渦旋1min，靜置10min，檢測時，色譜柱(Poroshell120C18柱，2.7μm)柱溫：35℃；進樣量：10.0μL；流動相：A相水溶液，B相甲醇，有效避免其他成份對檢測的影響，使檢測結果更加精準、更加穩定。

技術領域

本發明涉及蟲草素和腺苷同時檢測方法，具體涉及一種富硒蛹蟲草奶粉中蟲草素和腺苷的檢測方法。

背景技術

蛹蟲草資源開發利用及深入研究在近幾十年取得了很大進展，因其具有很高的營養價值和保健功效，蛹蟲草及其產品已被越來越多的消費者所接受，蛹蟲草的人工栽培已成規模，資源豐富，藥理作用廣泛，所以開發前景非常廣闊。奶粉含有鮮奶中的優質蛋白質、脂肪、多種維生素及礦物質，是適合飲用的營養佳品，將蛹蟲草和奶粉有機結合的蛹蟲草奶粉不僅保留了奶粉的營養成分，且增加了蛹蟲草的藥理作用，使其成為一種新型保健品，具有更高的營養價值，因此蟲草奶粉的研究和發展對蟲草的開發利用及我國乳制品行業今后的發展具有十分重大的意義和推動作用。

蟲草素腺苷的主要檢測方法是高效液相色譜法，現有技術中對蟲草素和腺苷的測定方法大多是針對人工培養蛹蟲草菌絲基質進行檢測，但這些檢測方法不能滿足富硒奶粉中蟲草素和腺苷的測定，目前在國內文獻中鮮少提到富硒奶粉中蟲草素和腺苷的檢測方法，且方法不完善，并沒有明確的檢出限及回收率實驗，不具有明顯的可靠性，因此尚需要進一步研究。

發明內容

針對以上問題，本發明的目的是提供一種高效、便捷、安全的富硒蛹蟲草奶粉中蟲草素和腺苷的檢測方法。

本發明的目的通過以下的技術方案實現： 一種富硒蛹蟲草奶粉中蟲草素和腺苷的檢測方法，包括以下檢測步驟：

步驟1試樣溶液的制備及提取：

（1）取蛹蟲草奶粉樣品0.50g（精確至0.01g）于50mL具塞離心管中，以一級水為提取溶劑，置渦旋儀以3000 r/min渦旋1 min后，超聲30 min；

（2）將超聲后的上述溶液以8000 r/min離心10min，取上清液1mL移至備有0.050 g（±0.001 g）SAX凈化劑（以硅膠為基質的強陰離子交換吸附劑）容器中，置渦旋儀以3000 r/min渦旋1 min，靜置10 min，取上清液過微孔濾膜，待上機分析；

步驟2蟲草素及腺苷標準品溶液的配置；

步驟3色譜條件及數據檢測。

將步驟1中所述試樣上清液及步驟2中蟲草素及腺苷混合標準溶液，按如下液相色譜條件進行測試：

色譜柱 （Poroshell120 C18柱，2.7μm）柱溫：35 ℃；進樣量：10.0 μL；流動相：A相為水溶液，B相為甲醇，梯度洗脫程序如下：0～1.0 min(B相10%)，1.0～5.5 min(B相10%～50%)，5.6～10.0 min(B相10%)；流速：0.25 mL/min；紫外檢測器檢測波長：260nm。

進一步，步驟2中，蟲草素及腺苷標準品溶液的配置包括以下具體步驟：

(1)準確稱取蟲草素、腺苷標準品各10 mg，用流動相分別定容到10 mL，搖勻，分別配置成質量濃度均為1000 μg/mL的蟲草素母液和腺苷母液；

(2)準確移取濃度為1000 μg/mL的蟲草素母液1 mL和1000 μg/mL的腺苷標母液1mL，置于同一容量瓶用一級水定容到10 mL，搖勻，配置成質量濃度為100 μg/mL的蟲草素和腺苷混合液；