[發(fā)明專(zhuān)利]一種快速、低成本從雞血中分離PCR模板的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811326872.1 | 申請(qǐng)日: | 2018-11-08 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN109402112A | 公開(kāi)(公告)日: | 2019-03-01 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 龔炎長(zhǎng);駱薇;袁楊楊 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12N15/10 | 分類(lèi)號(hào): | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司: | 武漢宇晨專(zhuān)利事務(wù)所 42001 | 代理人: | 王敏鋒 |
| 地址: | 430070 湖*** | 國(guó)省代碼: | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 雞血 低成本 滅菌水 槍頭 螯合型離子交換樹(shù)脂 細(xì)胞核 分離血細(xì)胞 分子檢測(cè) 血樣 快速DNA 放入 干熱 混勻 尖部 剪去 抗凝 裂解 水浴 搖勻 加熱 沉淀 耗時(shí) 冷凍 新鮮 檢測(cè) | ||
1.一種快速、低成本從雞血中分離PCR模板的方法,其步驟是:
A、從血樣中分離血細(xì)胞核:向1.5mL EP管中加入10-20μl新鮮、冷凍的抗凝雞血樣品,4000rpm離心1分鐘去上清;向管中加入500μl滅菌水,靜置一分鐘,9500rpm離心2-4分鐘,棄上清;
B、裂解細(xì)胞核:使用剪去槍頭尖部的槍頭向沉淀中加入200μl滅菌水搖勻的3-4%螯合型離子交換樹(shù)脂溶液,混勻后,55-57℃水浴30分鐘,再放入干熱儀,100℃加熱8分鐘;
C、PCR模板分離:9500rpm離心2分鐘,取上清作為PCR模板。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速、低成本從雞血中分離PCR模板的方,其特征在于:所述的PCR擴(kuò)增反應(yīng)的引物及擴(kuò)增條件:
。
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