[發(fā)明專利]一種香豆素衍生物及其合成方法和在檢測硫化氫中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811326163.3
• 申請日: 2018-11-08
• 公開（公告）號(hào): CN109485627B
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陰彩霞;霍方俊;趙琪;溫瑩
• 申請（專利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D311/16
• 分類號(hào): C07D311/16;G01N21/64
• 代理公司: 太原市科瑞達(dá)專利代理有限公司 14101
• 代理人: 劉寶賢

本發(fā)明提供了一種香豆素衍生物及其合成方法和在檢測硫化氫中的應(yīng)用，所述衍生物的中文名稱為2?氧代?2H?色烯?7?基2?((2,4?二硝基苯基)硫代)苯甲酸酯，英文名稱為2?oxo?2H?chromen?7?yl 2?((2,4?dinitrophenyl)thio)benzoate，命名為CDP。本發(fā)明提供了一種香豆素衍生物CDP對硫化氫特異性檢測的方法，在DMSO:PBS(7:3,v/v,PBS buffer,pH 7.4)的溶液中，通過熒光分光光度計(jì)定量檢測硫化氫的含量。該檢測過程簡便、靈敏、快速，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及香豆素衍生物和硫化氫檢測，具體屬于一種香豆素衍生物及其合成方法和在檢測硫化氫中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

研究表明，內(nèi)源性的硫化氫主要來自于L-硫化氫的酶解作用，其生成機(jī)制至少與4種不同的酶有關(guān):胱硫醚-β-合成酶(CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、3-巰基丙酮酸硫轉(zhuǎn)移酶(3-MST)和硫化氫酶(CL)。這些酶廣泛的存在于人體各種組織和器官中。在生理濃度水平下，硫化氫參與一系列的生理調(diào)控過程，例如調(diào)節(jié)血管張力、心肌收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)和胰島素分泌等。細(xì)胞一旦不能維持其正常的硫化氫濃度，便會(huì)引起動(dòng)脈和肺動(dòng)脈高壓、阿爾茨海默氏癥、胃粘膜損傷和肝硬化等疾病。此外，硫化氫也可清除活性氧和活性氮物種。許多研究還表明三個(gè)氣體遞質(zhì)硫化氫、一氧化氮和一氧化碳之間還通過各種交互作用調(diào)控人體的健康與疾病。

應(yīng)生物體系中硫化氫濃度水平檢測的要求，設(shè)計(jì)選擇性好、靈敏度高、具有低細(xì)胞毒性的用于檢測活細(xì)胞和組織內(nèi)硫化氫水平變化的熒光探針，已成為生物醫(yī)學(xué)發(fā)展中具有挑戰(zhàn)性的前沿課題之一。

在本發(fā)明中，合成了一種基于香豆素的化合物，通過硫化氫和化合物在反應(yīng)前后熒光變化，實(shí)現(xiàn)硫化氫的特異性檢測。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種香豆素衍生物及其制備方法，所述香豆素衍生物可用于硫化氫檢測，且檢測方法簡單，操作方便，選擇性好，靈敏度高。

本發(fā)明提供的一種香豆素衍生物，中文名稱為2-氧代-2H-色烯-7-基2-((2,4-二硝基苯基)硫代)苯甲酸酯，英文名稱為2-oxo-2H-chromen-7-yl 2-((2,4-dinitrophenyl)thio)benzoate，命名為CDP結(jié)構(gòu)式為：

本發(fā)明提供的一種香豆素衍生物CDP的合成方法，步驟為：

將2-[(2,4-二硝基苯基)硫代]苯甲酸，4-二甲基氨基吡啶，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和7-羥基香豆素在無水二氯甲烷中混合，將混合物在室溫下攪拌過夜；減壓除去溶劑，所得殘余物通過硅膠柱色譜進(jìn)一步純化，得到淺黃色粉末狀目標(biāo)物CDP；其中2-[(2,4-二硝基苯基)硫代]苯甲酸和7-羥基香豆素的摩爾比為1：1。

所述柱色譜的洗脫劑為體積比20：1的二氯甲烷和甲醇的混合物。

所述香豆素衍生物CDP可用于硫化氫檢測。

本發(fā)明提供的一種檢測硫化氫的方法，步驟為：

(1)、配制pH＝7.4、濃度為10mM的PBS緩沖溶液，配制20mM的硫化氫水溶液；

(2)、取2mL的DMSO/PBS(7:3v/v,pH 7.4)溶液、2μL CDP的DMSO溶液加到一個(gè)熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著待測樣硫化氫的加入,465nm處的熒光強(qiáng)度的逐漸增強(qiáng)；