[發明專利]一種發酵生產丁酸的方法在審
| 申請號: | 201811322835.3 | 申請日: | 2018-11-08 |
| 公開(公告)號: | CN109355318A | 公開(公告)日: | 2019-02-19 |
| 發明(設計)人: | 王菊芳;傅宏鑫;廖正平;索玉凱;張亞南;胡佳磊;郭曉龍 | 申請(專利權)人: | 華南理工大學 |
| 主分類號: | C12P7/52 | 分類號: | C12P7/52;C12R1/145 |
| 代理公司: | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人: | 宮愛鵬 |
| 地址: | 510640 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 丁酸 發酵 褐藻 甘露醇和葡萄糖 配制液體培養基 生物技術領域 副產物乙酸 海洋生物質 加工廢棄物 酪丁酸梭菌 液體培養基 種子液接種 分離純化 高效生物 高選擇性 混合底物 目標產物 混合物 水解液 種子液 滅菌 活化 制備 細胞 生產 替代 積累 轉化 | ||
1.一種發酵生產丁酸的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)將酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)活化,制備成種子液;
(2)以甘露醇和葡萄糖的混合物為碳源,配制液體培養基,并經過滅菌;
(3)將步驟(1)種子液接種于步驟(2)的液體培養基中,在溫度為35-39℃,pH為5-7,轉速為100-300rpm的條件下,進行細胞發酵,得到丁酸。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述酪丁酸梭菌為酪丁酸梭菌(Clostrdium tyrobutyricum)ATCC 25755。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述甘露醇和葡萄糖的質量比為1:4~3:2。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述甘露醇和葡萄糖的質量比為1:2~1:1。
5.根據權利要求1或2或3或4所述的方法,其特征在于,所述液體培養基為:2g/L酵母提取物,4g/L胰蛋白胨,2g/L(NH4)2SO4或CH3COONH4,1g/L K2HPO4,0.5g/L KH2PO4,0.1g/LMgSO4·7H2O和30-120g/L碳源。
6.根據權利要求1或2或3或4所述的方法,其特征在于,所述滅菌為115-121℃條件下滅菌15-30min。
7.根據權利要求1或2或3或4所述的方法,其特征在于,所述甘露醇來源于褐藻水解液或褐藻加工廢棄物。
8.根據權利要求7所述的方法,其特征在于,所述褐藻水解液是指褐藻通過物理、化學法和/或生物酶法處理得到的以甘露醇為主要成分的水解液;所述褐藻為海帶、馬尾藻或裙帶菜。
9.根據權利要求7所述的方法,其特征在于,所述褐藻水解液的制備方法如下:
(1)清洗褐藻去除表面的泥沙和鹽分,烘干,將褐藻碎成粉末;
(2)將褐藻粉末與0.05-0.5mol/L的硫酸以2.5-10:100的固液比混合,于100-121℃條件下水解0.5-2h;所得水解液離心后取上清,制得褐藻酸水解液。
10.根據權利要求9所述的方法,其特征在于,所述褐藻酶水解液的制備方法如下:
(1)調節權利要求9所述褐藻酸水解液pH值為5.0,加入1-10%(w/w褐藻粉末)纖維素酶,在40-60℃、100-200rpm條件下酶解24-72h;
(2)所得酶解液離心后取上清,得到褐藻酶解液。
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