[發明專利]一種從肝素副產物中提取類肝素或蛋白的工藝

有效

• 申請號: 201811312422.7
• 申請日: 2018-11-06
• 公開（公告）號: CN109402205B
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發明（設計）人: 朱新民;朱新良;馮勇
• 申請（專利權）人: 如皋市樺儒腸衣有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙) 11316
• 代理人: 陳真

本發明涉及一種從肝素副產物中提取類肝素或蛋白的工藝，包括如下步驟：（1）肝素副產物加熱水溶解，再加氯化鈉至完全溶解；（2）肝素副產物完全溶解，加入酶試劑A，調pH至8～10，加熱，再降至室溫，離心，得第一次離心液；（3）向第一次離心液加沉淀劑B，攪拌，進離心，得第二次離心濕固體物；（4）第二次離心濕固體物加熱水溶解，再加氯化鈉至完全溶解；（5）第二次離心濕固體物完全溶解，加乙醇沉淀，收集沉淀物一；（6）將沉淀物一加水溶解，超濾，得超濾液；（7）向超濾液中加氯化鈉溶解，再乙醇，收集沉淀物二；（8）沉淀物二烘干，得到類肝素或蛋白。本發明的優點在于：本發明工藝，能夠提高類肝素或蛋白回收率及其效價。

技術領域

本發明涉及一種類肝素的制備工藝，特別涉及一種從肝素副產物中提取類肝素或蛋白的工藝。

背景技術

類肝素，別名蛋白，是指天然的、合成的和半合成的與肝素有類似作用的物質，類肝素能夠與數百種蛋白質相結合，影響蛋白質的空間構象、壽命和生物活性，類肝素還可以和胞外基質中的多種蛋白質相結合，控制它們的分布、轉移和信息傳遞?？梢婎惛嗡厥且环N重要的信息分子，對主體細胞的行為如胞的增殖、分化、結合起調控作用，并參與對外來細胞的識別和控制過程。類肝素產品可作為生產舒洛地特，冠心舒等藥物的原料，此類藥物因安全有效，受到患者的廣泛認同。

從豬小腸粘膜經過離子交換以及分級沉淀生產肝素的過程中產生了大量的廢蛋白，這是因為樹脂吸附過程中樹脂也吸附蛋白，副產物蛋白中除了大量蛋白以外，其余主要成分為硫酸乙酰肝素（類肝素）。但是由于其中的有效物質分離困難，故產生肝素后一般將這些副產物丟棄或存儲，造成資源浪費。

針對上述現象，專利CN 105037584 B公開了一種從肝素副產物廢蛋白中分離類肝素的方法，包括如下步驟：1）將肝素副產物

廢蛋白制成溶液；2)向溶液中加入吸附劑進行吸附；3）對吸附劑進行洗滌和洗脫，收集洗脫液并進行沉淀，得到沉淀固體一；4）將沉淀固體一制成溶液，之后依次經過調節pH、氧化、調節pH、還原、調節pH、調節鹽濃度以及沉淀，得到沉淀固體二；5）將沉淀固體二烘干，得到類肝素。該從肝素副產物廢蛋白中分離類肝素的方法，進行廢物利用，節約成本，而且具有工藝簡單，成本較低的特點；但該從肝素副產物廢蛋白中分離類肝素的方法，仍存在一定的缺點：1.從副產物廢蛋白中回收類肝素的回收率低；2.分離出的類肝素效價相對較低。

因此，研發一種能夠提高類肝素回收率及其效價的從肝素副產物中提取類肝素或蛋白的工藝是非常有必要的。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種能夠提高類肝素回收率及其效價的從肝素副產物中提取類肝素或蛋白的工藝。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案為：一種從肝素副產物中提取類肝素或蛋白的工藝，其創新點在于：包括如下步驟：

（1）將肝素副產物加95-100℃的熱水溶解，然后加入按重量百分比4～6%的分析純氯化鈉至完全溶解；

（2）肝素副產物完全溶解后，加入酶試劑，調節pH到8～10；然后加熱至50～60℃，并保溫1～3小時，接著升溫至95～105℃，最后用循環水降溫至室溫，降至室溫后，第一次離心去除固體雜質，得到第一次離心液；其中，酶試劑是按重量份數由12-16份半胱氨酸、1-3份胰蛋白酶和0.4-0.6份亞硫酸鈉制成；

（3）向第一次離心液加入離心液體積的1-2%的沉淀劑，并攪拌25～35min，攪拌后，進行第二次離心，得到第二次離心液和第二次離心濕固體物；其中，所述沉淀劑是按重量份數由1-2份5-磺基水楊酸、20-25份丙酮、55-60份甲醇和15-25份蒸餾水制成；

（4）向第二次離心濕固體物加熱水溶解，然后加入重量百分比為14～16%的氯化鈉攪拌至完全溶解；

（5）第二次離心濕固體物完全溶解后，加入乙醇沉淀，沉淀11～13小時后，收集沉淀物一；