[發(fā)明專利]一種從肝素副產(chǎn)物中提取類肝素或蛋白的工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811312422.7
• 申請日: 2018-11-06
• 公開（公告）號: CN109402205B
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱新民;朱新良;馮勇
• 申請（專利權(quán)）人: 如皋市樺儒腸衣有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 北京一格知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11316
• 代理人: 陳真

1.一種從肝素副產(chǎn)物中提取類肝素的工藝，其特征在于：包括如下步驟：

（1）將肝素副產(chǎn)物加95-100℃的熱水溶解，然后加入按重量百分比4～6%的分析純氯化鈉至完全溶解；

（2）肝素副產(chǎn)物完全溶解后，加入酶試劑，調(diào)節(jié)pH到8～10；然后加熱至50～60℃，并保溫1～3小時，接著升溫至95～105℃，最后用循環(huán)水降溫至室溫，降至室溫后，第一次離心去除固體雜質(zhì)，得到第一次離心液；其中，酶試劑是按重量份數(shù)由12-16份半胱氨酸、1-3份胰蛋白酶和0.4-0.6份亞硫酸鈉制成；

（3）向第一次離心液加入離心液體積的1-2%的沉淀劑，并攪拌25～35min，攪拌后，進(jìn)行第二次離心，得到第二次離心液和第二次離心濕固體物；其中，所述沉淀劑是按重量份數(shù)由1-2份5-磺基水楊酸、20-25份丙酮、55-60份甲醇和15-25份蒸餾水制成；

（4）向第二次離心濕固體物加熱水溶解，然后加入重量百分比為14～16%的氯化鈉攪拌至完全溶解；

（5）第二次離心濕固體物完全溶解后，加入乙醇沉淀，沉淀11～13小時后，收集沉淀物一；

（6）將沉淀物一加水溶解，溶解后，超濾1～3小時，得超濾液；

（7）向超濾液中加氯化鈉溶解，溶解后，再加入乙醇沉淀，沉淀11～13小時后，收集沉淀物二；

（8）將沉淀物二烘干，得到類肝素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從肝素副產(chǎn)物中提取類肝素的工藝，其特征在于：所述（1）中，肝素副產(chǎn)物與熱水的質(zhì)量比是1:11～13，肝素副產(chǎn)物與分析純氯化鈉的質(zhì)量比為1:0.6～0.65。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從肝素副產(chǎn)物中提取類肝素的工藝，其特征在于：所述（2）中的酶試劑與（1）中肝素副產(chǎn)物的質(zhì)量比為0.035～0.4:1。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從肝素副產(chǎn)物中提取類肝素的工藝，其特征在于：所述（5）中乙醇選用質(zhì)量百分濃度為80～90%的乙醇，且乙醇的用量為，以溶解液為1，乙醇與溶解液的比為1.5:1。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從肝素副產(chǎn)物中提取類肝素的工藝，其特征在于：所述（7）中氯化鈉選用質(zhì)量百分濃度為2～4%的分析純氯化鈉，乙醇選用質(zhì)量百分濃度為92～98%的乙醇，且乙醇的用量為，以溶解液為1，乙醇與溶解液的比為1.5:1。