[發(fā)明專利]CrGlut1表達(dá)基因、表達(dá)載體、萊茵衣藻工程藻及制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811310625.2
• 申請(qǐng)日: 2018-11-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109439666A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡章立;黃觀欽;賈彬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/12
• 分類號(hào): C12N15/12;C12N15/79;C12N1/13;C12N15/66
• 代理公司: 深圳市恒申知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙) 44312
• 代理人: 袁文英

1.一種CrGlut1表達(dá)基因，其特征在于，具有序列表SEQ.ID.NO.1的核苷酸序列。

2.一種含有權(quán)利要求1所述的CrGlut1表達(dá)基因的表達(dá)載體。

3.如權(quán)利要求2所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體中載體質(zhì)粒為pHR13質(zhì)粒。

4.如權(quán)利要求3所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體中CrGlut1表達(dá)基因被配置為受萊茵衣藻組成型啟動(dòng)Arg7的調(diào)控。

5.一種轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻，其特征在于，含有權(quán)利要求2至4任一項(xiàng)所述的表達(dá)載體。

6.如權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻，其特征在于，所述轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻的工程藻宿主為細(xì)胞壁缺陷性萊茵衣藻JUV。

7.一種權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

以權(quán)利要求1所述的CrGlut1表達(dá)基因?yàn)槟０暹M(jìn)行擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；

將所述擴(kuò)增產(chǎn)物與pHR13質(zhì)粒分別用限制性內(nèi)切酶雙酶切后，再用連接酶連接，獲得重組表達(dá)載體；

將所述重組表達(dá)載體導(dǎo)入萊茵衣藻工程藻宿主中，即獲得轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻。

8.如權(quán)利要求7所述的轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻的制備方法，其特征在于，以所述的CrGlut1表達(dá)基因?yàn)槟０暹M(jìn)行擴(kuò)增步驟中，所采用的引物包括具有序列表SEQ.ID.NO.2的核苷酸序列的上游引物、以及具有序列表SEQ.ID.NO.3的核苷酸序列的下游引物。

9.如權(quán)利要求8所述的轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻的制備方法，其特征在于，所述限制性內(nèi)切酶雙酶切過(guò)程中，限制性內(nèi)切酶為Nde I和BamH I。

10.如權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因萊茵衣藻在制備保健食品、異養(yǎng)生物反應(yīng)器、醫(yī)藥、水產(chǎn)養(yǎng)殖餌料或者動(dòng)物飼料添加劑中的應(yīng)用。