[發明專利]一種酶解法制備淫羊藿苷的方法

在審

• 申請號: 201811307005.3
• 申請日: 2018-11-05
• 公開（公告）號: CN109295121A
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 夏之寧;尹蔓妮;張起輝
• 申請（專利權）人: 重慶大學
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

本發明公開了一種酶解法制備淫羊藿苷的方法，屬于藥物制備領域。本發明的方法主要利用鼠李糖苷酶促使淫羊藿中的朝藿定C發生酶解反應，從而轉化為淫羊藿苷。本方法具有操作簡單、環境友好、經濟可行的優點，能夠將淫羊藿中含量較高的多糖苷類物質朝藿定C轉化為淫羊藿苷，從而提高淫羊藿苷的產率，彌補現有技術中的不足。

技術領域

本發明屬于藥物制備領域，具體涉及一種酶解法制備淫羊藿苷的方法。

背景技術

淫羊藿苷是一種具有8-異戊烯基黃酮母核的黃酮類物質，分子式C₃₃H₄₀O₁₅，分子量為676.65，CAS號為489-32-7，主要存在于淫羊藿屬植物例如淫羊藿、巫山淫羊藿、箭葉淫羊藿、朝鮮淫羊藿和柔毛淫羊藿莖葉提取物中，具有補腎壯陽，強壯筋骨，增加心血管血流量，促進造血功能、免疫功能和抗衰老等功效。

目前常見的淫羊藿苷制備方法是通過進行水醇提取得到淫羊藿的主要成分，然后通過各種型號的大孔樹脂柱、聚酰胺柱、硅膠柱等分離。中國專利CN101607976A采用了甲醇或乙醇提取淫羊藿得浸膏，再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇做溶劑萃取不同部位，選用硅膠柱色譜和聚酰胺柱色譜進行分離提純得到淫羊藿苷。上述方法工藝復雜，所耗有機溶劑多，得率低，不利于工業化生產；而中國專利CN102718819A主要是通過對淫羊藿原料進行水加熱提取、大孔樹脂分離、柱分離精制得到淫羊藿苷，該方法操作復雜，需要經過兩次層析處理，不利于大量生產；中國專利CN103396463A首先對淫羊藿進行乙醇水溶液微波提取，利用微孔濾膜除去其中的微粒雜質，再通過模擬移動床色譜進行分離和純化，最后經過濃縮噴霧干燥得淫羊藿苷成品，該方法運用到了模擬移動床色譜技術，存在著儀器的限制，不便于推廣。以上現存的淫羊藿苷制備方法普遍都是以淫羊藿植物為原料來獲得淫羊藿苷的，但淫羊藿植物中淫羊藿苷含量交低，只有0.5％左右，因此通過復雜操作工序制備的淫羊藿苷的得率仍然低。

因此，尋找一種得率高的淫羊藿苷制備方法是及其具具備市場開發意義的。淫羊藿屬植物中除了含有二糖苷淫羊藿苷外，還含有與淫羊藿苷具有同樣母核的三糖苷物質，如朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C，其中朝藿定C在淫羊藿屬植物巫山淫羊藿中具有豐富的含量，達到2.5％～4.0％，對比朝藿定C(圖1中a所示)、淫羊藿苷的結構(圖1中b所示)，發現朝藿定C與淫羊藿苷在C3位上差一個鼠李糖，因此可以采用酶解方法將巫山淫羊藿中高含量的朝藿定C轉化獲得大量淫羊藿苷。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種酶解法制備淫羊藿苷的方法。

為實現上述發明目的，本發明提供如下技術方案：

1、一種酶解法制備淫羊藿苷的方法，所述方法為通過酶解法將淫羊藿中的朝藿定C轉化為淫羊藿苷。

優選的，所述淫羊藿為巫山淫羊藿。

優選的，所述酶解法采用的酶為鼠李糖苷酶。

優選的，所述方法的具體操作如下：

(1)淫羊藿浸膏的制備：取淫羊藿粉末，過三號篩后加入體積分數為70％-75％的乙醇，所述巫山淫羊藿粉末與乙醇的質量體積比為1:20～30，g:mL；旋轉蒸發得到殘留固體，真空干燥即得淫羊藿浸膏；

(2)酶解反應：按照1:1，mmol:U的比例依次加入淫羊藿浸膏與鼠李糖苷酶，再加入酸性緩沖溶液與酶穩定劑，所述淫羊藿浸膏與酸性緩沖溶液、酶穩定劑的質量體積比為1:2:2，g:mL:mg，在40～60℃的水浴條件下進行酶解反應，抽取少量反應液檢測朝藿定C轉化率達到98％時進行沸水滅活結束反應。

(3)淫羊藿苷純化：將(2)中酶解反應結束后的反應液用等體積的乙酸乙酯進行萃取三次，收集上層液體，旋轉蒸發后進行重結晶得到純化的淫羊藿苷。

優選的，步驟(1)中所述淫羊藿粉末與乙醇的質量體積比為1:25，g:mL。